◎ বহুমুখী, নির্ভরযোগ্য অন-ডিমান্ড লিকুইড হ্যান্ডলিং এর জন্য মাইক্রোসুইচ

www.chinacdoe.com দেখার জন্য আপনাকে ধন্যবাদ।আপনি যে ব্রাউজার সংস্করণটি ব্যবহার করছেন তাতে সীমিত CSS সমর্থন রয়েছে৷সেরা অভিজ্ঞতার জন্য, আমরা আপনাকে একটি আপডেট করা ব্রাউজার ব্যবহার করার পরামর্শ দিই (অথবা ইন্টারনেট এক্সপ্লোরারে সামঞ্জস্য মোড অক্ষম করুন)৷ইতিমধ্যে, অব্যাহত সমর্থন নিশ্চিত করতে, আমরা স্টাইল এবং জাভাস্ক্রিপ্ট ছাড়াই সাইটটিকে রেন্ডার করব।

অন-সাইট ক্ষমতা সহ ল্যাব-অন-এ-চিপ সিস্টেমগুলি দ্রুত এবং নির্ভুল রোগ নির্ণয়ের সম্ভাবনা অফার করে এবং যেখানে বায়োমেডিকেল সরঞ্জাম এবং প্রশিক্ষিত পেশাদার পাওয়া যায় না সেখানে সংস্থান-সীমাবদ্ধ সেটিংসে দরকারী।যাইহোক, একটি পয়েন্ট-অফ-কেয়ার টেস্টিং সিস্টেম তৈরি করা যা একই সাথে বহু-কার্যকরী বিতরণ, অন-ডিমান্ড রিলিজ, নির্ভরযোগ্য কর্মক্ষমতা এবং বিকারকগুলির দীর্ঘমেয়াদী স্টোরেজের জন্য সমস্ত প্রয়োজনীয় বৈশিষ্ট্য রয়েছে।এখানে আমরা একটি লিভার-অ্যাকচুয়েটেড মাইক্রো ট্র্যাভেল সুইচ প্রযুক্তির বর্ণনা দিচ্ছি যা যে কোনো দিকে তরলকে ম্যানিপুলেট করতে পারে, প্রয়োগকৃত বায়ুচাপের সুনির্দিষ্ট এবং আনুপাতিক প্রতিক্রিয়া প্রদান করতে পারে এবং আকস্মিক নড়াচড়া এবং কম্পনের বিরুদ্ধে স্থিতিশীল থাকতে পারে।প্রযুক্তির উপর ভিত্তি করে, আমরা একটি পলিমারেজ চেইন রিঅ্যাকশন সিস্টেমের বিকাশও বর্ণনা করি যা বিকারক প্রবর্তন, মিশ্রণ এবং প্রতিক্রিয়া ফাংশনগুলিকে এক প্রক্রিয়ায় একীভূত করে, যা 18 রোগীর সমস্ত ক্লিনিকাল অনুনাসিক নমুনার জন্য "নমুনা-ইন-উত্তর-আউট" কর্মক্ষমতা সম্পন্ন করে। ইনফ্লুয়েঞ্জা এবং 18টি পৃথক নিয়ন্ত্রণ, স্ট্যান্ডার্ড পলিমারেজ চেইন বিক্রিয়া (পিয়ারসন সহগ > 0.9) এর সাথে ফ্লুরোসেন্স তীব্রতার ভাল সঙ্গতিতে।প্রযুক্তির উপর ভিত্তি করে, আমরা একটি পলিমারেজ চেইন রিঅ্যাকশন সিস্টেমের উন্নয়নও বর্ণনা করি যা বিকারক প্রবর্তন, মিশ্রণ এবং প্রতিক্রিয়া ফাংশনগুলিকে এক প্রক্রিয়ায় একীভূত করে, যা 18 রোগীর সমস্ত ক্লিনিকাল অনুনাসিক নমুনার জন্য "নমুনা-ইন-উত্তর-আউট" কর্মক্ষমতা সম্পন্ন করে। ইনফ্লুয়েঞ্জা এবং 18টি স্বতন্ত্র নিয়ন্ত্রণের সাথে, স্ট্যান্ডার্ড পলিমারেজ চেইন বিক্রিয়া (পিয়ারসন সহগ > 0.9) এর সাথে ফ্লুরোসেন্স তীব্রতার ভাল সঙ্গতিতে।Основываясь на этой технологии, мы также описываем разработку системы полимеразной цепной реакции, которая объединяет функции введения реагентов, смешивания и реакции в одном процессе, что обеспечивает выполнение «образец-в-ответ-выход» для всех клинических образцов из носа от 18 пациентов с Грипп и 18 отдельных контролей, в хорошем соответствии интенсивности флуоресценции со стандартной полимеразной Полимеразной Полимеразной цепицыфин на> 0,9)।এই প্রযুক্তির উপর ভিত্তি করে, আমরা একটি পলিমারেজ চেইন রিঅ্যাকশন সিস্টেমের উন্নয়নও বর্ণনা করি যা একটি একক প্রক্রিয়ায় ইনজেকশন, মেশানো এবং প্রতিক্রিয়া করার কাজগুলিকে একত্রিত করে, 18 জন ইনফ্লুয়েঞ্জা রোগীর সমস্ত ক্লিনিকাল অনুনাসিক নমুনার জন্য নমুনা-ইন-প্রতিক্রিয়া-আউট সক্ষম করে৷এবং 18টি পৃথক নিয়ন্ত্রণ, স্ট্যান্ডার্ড পলিমারেজ চেইন প্রতিক্রিয়া ফ্লুরোসেন্স তীব্রতার সাথে ভাল চুক্তিতে (পিয়ারসনের সহগ > 0.9)।এই প্রযুক্তির উপর ভিত্তি করে, আমরা একটি পলিমারেজ চেইন রিঅ্যাকশন সিস্টেমের উন্নয়নও বর্ণনা করি যা বিকারক ইনজেকশন, মিক্সিং এবং প্রতিক্রিয়া ফাংশনগুলিকে একীভূত করে 18টি ইন-নমুনা অনুনাসিক রোগীর নমুনা থেকে সমস্ত ক্লিনিকাল অনুনাসিক নমুনা বিশ্লেষণ করে৷ ইনফ্লুয়েঞ্জা এবং 18টি পৃথক নিয়ন্ত্রণ, ফ্লুরোসেন্সের তীব্রতা মিলেছে৷ স্ট্যান্ডার্ড পলিমারেজ চেইন বিক্রিয়া সহ (পিয়ারসনের সহগ > 0.9)।প্রস্তাবিত প্ল্যাটফর্মটি বায়োমেডিকাল বিশ্লেষণের নির্ভরযোগ্য স্বয়ংক্রিয়তার গ্যারান্টি দেয় এবং এইভাবে পয়েন্ট-অফ-কেয়ার টেস্টিং ডিভাইসগুলির একটি পরিসরের বাণিজ্যিকীকরণকে ত্বরান্বিত করতে পারে।
উদীয়মান মানব রোগ, যেমন 2020 কোভিড-19 মহামারী যা লক্ষ লক্ষ মানুষের জীবন দাবি করেছে, বিশ্ব স্বাস্থ্য এবং মানব সভ্যতার জন্য একটি গুরুতর হুমকি হয়ে দাঁড়িয়েছে।ভাইরাসের বিস্তার নিয়ন্ত্রণ এবং চিকিত্সার ফলাফল উন্নত করার জন্য রোগের প্রাথমিক, দ্রুত এবং সঠিক সনাক্তকরণ গুরুত্বপূর্ণ।কেন্দ্রীভূত ল্যাবগুলির উপর ভিত্তি করে একটি মূল ডায়াগনস্টিক ইকোসিস্টেম যেখানে পরীক্ষার নমুনাগুলি হাসপাতাল বা ডায়াগনস্টিক ক্লিনিকগুলিতে পাঠানো হয় এবং পেশাদারদের দ্বারা পরিচালিত হয় বর্তমানে বিশ্বব্যাপী প্রায় 5.8 বিলিয়ন লোকের অ্যাক্সেস সীমাবদ্ধ করছে, বিশেষ করে যারা সংস্থান-সীমাবদ্ধ সেটিংসে বসবাস করছেন।যেখানে ব্যয়বহুল বায়োমেডিকেল যন্ত্রপাতি এবং যোগ্য বিশেষজ্ঞের অভাব রয়েছে।চিকিত্সক 2. এইভাবে, পয়েন্ট-অফ-কেয়ার টেস্টিং (POCT) সক্ষমতা সহ একটি সস্তা এবং ব্যবহারকারী-বান্ধব ল্যাব-অন-এ-চিপ সিস্টেম বিকাশের জরুরি প্রয়োজন রয়েছে যা ক্লিনিশিয়ানদের সঠিক নির্ণয়ের সিদ্ধান্ত নিতে সময়মত ডায়াগনস্টিক তথ্য সরবরাহ করতে পারে। .এবং চিকিত্সা 3.
বিশ্ব স্বাস্থ্য সংস্থা (WHO) নির্দেশিকা বলে যে একটি আদর্শ POCT হতে হবে সাশ্রয়ী মূল্যের, ব্যবহারকারী-বান্ধব (ন্যূনতম প্রশিক্ষণের সাথে ব্যবহার করা সহজ), নির্ভুল (মিথ্যা নেতিবাচক বা মিথ্যা ইতিবাচক এড়িয়ে চলুন), দ্রুত এবং নির্ভরযোগ্য (ভাল পুনরাবৃত্তিযোগ্য বৈশিষ্ট্য প্রদান করা) এবং বিতরণযোগ্য (দীর্ঘমেয়াদী স্টোরেজ করতে সক্ষম এবং শেষ ব্যবহারকারীদের জন্য সহজেই উপলব্ধ) 4.এই প্রয়োজনীয়তাগুলি পূরণ করার জন্য, POCT সিস্টেমগুলিকে অবশ্যই নিম্নলিখিত বৈশিষ্ট্যগুলি সরবরাহ করতে হবে: ম্যানুয়াল হস্তক্ষেপ কমাতে বহুমুখী ডোজ, সঠিক পরীক্ষার ফলাফলের জন্য রিএজেন্ট পরিবহন স্কেল করার জন্য অন-ডিমান্ড রিলিজ এবং পরিবেশগত কম্পন সহ্য করার জন্য নির্ভরযোগ্য কর্মক্ষমতা।বর্তমানে, সর্বাধিক ব্যবহৃত POCT ডিভাইসটি হল পার্শ্বীয় প্রবাহ স্ট্রিপ5,6 যা ছিদ্রযুক্ত নাইট্রোসেলুলোজ ঝিল্লির বেশ কয়েকটি স্তর নিয়ে গঠিত যা কৈশিক বল দ্বারা প্রাক-অচল বিকারকগুলির সাথে বিক্রিয়া করে খুব অল্প পরিমাণ নমুনাকে সামনের দিকে ঠেলে দেয়।যদিও তাদের কম খরচে, ব্যবহারের সহজতা এবং দ্রুত ফলাফলের সুবিধা রয়েছে, ফ্লো স্ট্রিপ-ভিত্তিক POCT ডিভাইসগুলি বহু-পর্যায়ের বিশ্লেষণের প্রয়োজন ছাড়াই শুধুমাত্র জৈবিক পরীক্ষার জন্য (যেমন, গ্লুকোজ পরীক্ষা 7,8 এবং গর্ভাবস্থা পরীক্ষা9,10) ব্যবহার করা যেতে পারে।প্রতিক্রিয়া (যেমন একাধিক রিএজেন্ট লোড করা, মিশ্রণ, মাল্টিপ্লেক্সিং)।উপরন্তু, তরল চলাচল নিয়ন্ত্রণকারী চালিকা শক্তিগুলি (অর্থাৎ, কৈশিক শক্তি) ভাল সামঞ্জস্য প্রদান করে না, বিশেষ করে ব্যাচগুলির মধ্যে, যার ফলে দুর্বল প্রজননযোগ্যতা 11 এবং পার্শ্বীয় প্রবাহ ব্যান্ডগুলি প্রাথমিকভাবে ভাল সনাক্তকরণের জন্য দরকারী 12,13 তৈরি করে।
মাইক্রো- এবং ন্যানোস্কেলে বর্ধিত উত্পাদন ক্ষমতা 14,15,16,17 পরিমাণগত পরিমাপের জন্য মাইক্রোফ্লুইডিক POCT ডিভাইসগুলির বিকাশের সুযোগ তৈরি করেছে।ইন্টারফেস 18, 19 এবং চ্যানেল 20, 21, 22 এর জ্যামিতির বৈশিষ্ট্যগুলি সামঞ্জস্য করে, এই ডিভাইসগুলির কৈশিক বল এবং প্রবাহের হার নিয়ন্ত্রণ করা যেতে পারে।যাইহোক, তাদের নির্ভরযোগ্যতা, বিশেষত অত্যন্ত ভেজা তরলগুলির জন্য, উত্পাদনের ত্রুটি, উপাদানের ত্রুটি এবং পরিবেশগত কম্পনের সংবেদনশীলতার কারণে অগ্রহণযোগ্য থেকে যায়।উপরন্তু, যেহেতু তরল-গ্যাস ইন্টারফেসে একটি কৈশিক প্রবাহ তৈরি হয়, বিশেষ করে তরল দিয়ে মাইক্রোফ্লুইডিক চ্যানেল পূরণ করার পরে কোনও অতিরিক্ত প্রবাহ চালু করা যায় না।অতএব, আরও জটিল সনাক্তকরণের জন্য, নমুনা ইনজেকশনের কয়েকটি ধাপ 24,25 সঞ্চালিত করা আবশ্যক।
মাইক্রোফ্লুইডিক ডিভাইসগুলির মধ্যে, সেন্ট্রিফিউগাল মাইক্রোফ্লুইডিক ডিভাইসগুলি বর্তমানে POCT26,27 এর জন্য সেরা সমাধানগুলির মধ্যে একটি।এর ড্রাইভ মেকানিজম সুবিধাজনক যে চালিকা শক্তি ঘূর্ণন গতি সামঞ্জস্য করে নিয়ন্ত্রণ করা যেতে পারে।যাইহোক, অসুবিধা হল যে কেন্দ্রাতিগ শক্তি সর্বদা ডিভাইসের বাইরের প্রান্তের দিকে পরিচালিত হয়, এটি আরও জটিল বিশ্লেষণের জন্য প্রয়োজনীয় বহু-পদক্ষেপের প্রতিক্রিয়াগুলি বাস্তবায়ন করা কঠিন করে তোলে।যদিও অতিরিক্ত ড্রাইভিং ফোর্স (যেমন কৈশিক 28, 29 এবং আরও অনেকগুলি 30, 31, 32, 33, 34, 35) কেন্দ্রাতিগ শক্তি ছাড়াও বহুমুখী ডোজিংয়ের জন্য চালু করা হয়েছে, অপ্রত্যাশিত তরল স্থানান্তর এখনও ঘটতে পারে কারণ এই অতিরিক্ত শক্তিগুলি সাধারণত আদেশ হয়। কেন্দ্রাতিগ শক্তির চেয়ে কম মাত্রার, এগুলিকে শুধুমাত্র ছোট অপারেটিং রেঞ্জে কার্যকর করে বা তরল মুক্তির সাথে চাহিদা অনুযায়ী উপলব্ধ নয়।সেন্ট্রিফিউগাল মাইক্রোফ্লুইডিক্সে বায়ুসংক্রান্ত ম্যানিপুলেশনগুলি অন্তর্ভুক্ত করা যেমন সেন্ট্রিফিউগাল গতিবিদ্যা পদ্ধতি 36, 37, 38, থার্মোপনিউমেটিক পদ্ধতি 39 এবং সক্রিয় বায়ুসংক্রান্ত পদ্ধতি 40 একটি আকর্ষণীয় বিকল্প হিসাবে প্রমাণিত হয়েছে।কাউন্টারফুগোডাইনামিক পদ্ধতির সাথে, একটি অতিরিক্ত গহ্বর এবং সংযোগকারী মাইক্রোচ্যানেলগুলি বাহ্যিক এবং অভ্যন্তরীণ উভয় ক্রিয়াকলাপের জন্য ডিভাইসে একীভূত করা হয়, যদিও এর পাম্পিং দক্ষতা (75% থেকে 90% পর্যন্ত) পাম্পিং চক্রের সংখ্যা এবং সান্দ্রতার উপর অত্যন্ত নির্ভরশীল। তরলথার্মোপনিউমেটিক পদ্ধতিতে, ল্যাটেক্স মেমব্রেন এবং তরল স্থানান্তর চেম্বার বিশেষভাবে তৈরি করা হয় যাতে আটকে থাকা বায়ুর পরিমাণ উত্তপ্ত বা শীতল হয়ে গেলে খাঁড়িটি সীল বা পুনরায় খোলার জন্য।যাইহোক, হিটিং/কুলিং সেটআপ ধীর প্রতিক্রিয়া সমস্যা প্রবর্তন করে এবং থার্মোসেনসিটিভ অ্যাসে (যেমন, পলিমারেজ চেইন রিঅ্যাকশন (পিসিআর) পরিবর্ধন) এর ব্যবহার সীমিত করে।একটি সক্রিয় বায়ুসংক্রান্ত পদ্ধতির সাহায্যে, উচ্চ-গতির মোটর দ্বারা ইতিবাচক চাপ এবং সুনির্দিষ্টভাবে মিলিত ঘূর্ণন গতির একযোগে প্রয়োগের মাধ্যমে অন-ডিমান্ড রিলিজ এবং অভ্যন্তরীণ আন্দোলন অর্জন করা হয়।শুধুমাত্র বায়ুসংক্রান্ত অ্যাকচুয়েটর (ধনাত্মক চাপ 41, 42 বা ঋণাত্মক চাপ 43) এবং সাধারণত বন্ধ ভালভ ডিজাইন ব্যবহার করে অন্যান্য সফল পদ্ধতি রয়েছে।বায়ুসংক্রান্ত চেম্বারে ক্রমাগত চাপ প্রয়োগ করে, তরলটিকে পেরিস্টাল্টিকভাবে সামনের দিকে পাম্প করা হয় এবং সাধারণত বন্ধ ভালভ পেরিস্টালসিসের কারণে তরলটির পিছনের প্রবাহকে বাধা দেয়, এইভাবে জটিল তরল ক্রিয়াকলাপ উপলব্ধি করে।যাইহোক, বর্তমানে শুধুমাত্র সীমিত সংখ্যক মাইক্রোফ্লুইডিক প্রযুক্তি রয়েছে যা একটি একক POCT ডিভাইসে জটিল তরল ক্রিয়াকলাপ সম্পাদন করতে পারে, যার মধ্যে রয়েছে বহু-কার্যকরী বিতরণ, অন-ডিমান্ড রিলিজ, নির্ভরযোগ্য কর্মক্ষমতা, দীর্ঘমেয়াদী স্টোরেজ, উচ্চ-সান্দ্রতা তরল পরিচালনা, এবং খরচ কার্যকর উত্পাদন.সব একই সময়ে.মাল্টি-স্টেপ ফাংশনাল অপারেশনের অভাবও একটি কারণ হতে পারে কেন শুধুমাত্র কয়েকটি বাণিজ্যিক POCT পণ্য যেমন Cepheid, Binx, Visby, Cobas Liat, এবং Rhonda আজ পর্যন্ত খোলা বাজারে সফলভাবে চালু করা হয়েছে।
এই কাগজে, আমরা সবুজ রিং মাইক্রো সুইচ প্রযুক্তি (FAST) এর উপর ভিত্তি করে একটি বায়ুসংক্রান্ত মাইক্রোফ্লুইডিক অ্যাকুয়েটর প্রস্তাব করি।FAST মাইক্রোলিটার থেকে মিলিলিটার পর্যন্ত বিস্তৃত বিকারকগুলির জন্য একই সময়ে সমস্ত প্রয়োজনীয় বৈশিষ্ট্যগুলিকে একত্রিত করে।FAST ইলাস্টিক মেমব্রেন, লিভার এবং ব্লক নিয়ে গঠিত।বায়ুচাপ প্রয়োগ না করে, ঝিল্লি, লিভার এবং ব্লকগুলি শক্তভাবে বন্ধ করা যেতে পারে এবং ভিতরের তরল দীর্ঘ সময়ের জন্য সংরক্ষণ করা যেতে পারে।যখন উপযুক্ত চাপ প্রয়োগ করা হয় এবং লিভারের দৈর্ঘ্যের সাথে সামঞ্জস্য করা হয়, তখন ডায়াফ্রামটি প্রসারিত হয় এবং লিভারটিকে খোলা অবস্থানে ঠেলে দেয়, যার মাধ্যমে তরলটি যেতে পারে।এটি একটি ক্যাসকেড, একযোগে, ক্রমিক বা নির্বাচনী পদ্ধতিতে তরলগুলির বহুমুখী পরিমাপের অনুমতি দেয়।
আমরা ইনফ্লুয়েঞ্জা A এবং B ভাইরাস (IAV এবং IBV) সনাক্তকরণের জন্য নমুনা থেকে প্রতিক্রিয়া তৈরি করতে FAST ব্যবহার করে একটি PCR সিস্টেম তৈরি করেছি।আমরা 102 কপি/এমএল সনাক্তকরণের একটি নিম্ন সীমা (LOD) অর্জন করেছি, আমাদের মাল্টিপ্লেক্স পরীক্ষা IAV এবং IBV-এর জন্য নির্দিষ্টতা দেখিয়েছে এবং ইনফ্লুয়েঞ্জা ভাইরাস প্যাথোটাইপিংয়ের অনুমতি দিয়েছে।18 জন রোগী এবং 18 জন সুস্থ ব্যক্তির অনুনাসিক সোয়াব নমুনা ব্যবহার করে ক্লিনিকাল পরীক্ষার ফলাফলগুলি স্ট্যান্ডার্ড RT-PCR (পিয়ারসন সহগ > 0.9) এর সাথে ফ্লুরোসেন্স তীব্রতার সাথে ভাল মিল দেখায়।18 জন রোগী এবং 18 জন সুস্থ ব্যক্তির অনুনাসিক সোয়াব নমুনা ব্যবহার করে ক্লিনিকাল পরীক্ষার ফলাফলগুলি স্ট্যান্ডার্ড RT-PCR (পিয়ারসন সহগ > 0.9) এর সাথে ফ্লুরোসেন্স তীব্রতার সাথে ভাল মিল দেখায়।Результаты клинических испытаний с использованием образца мазка из носа от 18 пациентов и 18 здоровых лиц покатевых показовых нсивности флуоресценции стандартной ОТ-ПЦР (коэффициенты Пирсона > 0,9)।18 জন রোগী এবং 18 জন সুস্থ ব্যক্তির অনুনাসিক সোয়াব নমুনা ব্যবহার করে ক্লিনিকাল ট্রায়ালের ফলাফলগুলি স্ট্যান্ডার্ড RT-PCR (পিয়ারসনের সহগ > 0.9) এর ফ্লুরোসেন্স তীব্রতার মধ্যে ভাল চুক্তি দেখায়।0.9) ...................... Результаты клинических испытаний с использованием образцов назальных мазков от 18 пациентов и 18 здоливых лицавец пациентов ду интенсивностью флуоресценции и стандартной ОТ-ПЦР (коэффициент Пирсона > 0,9)।18 জন রোগী এবং 18 জন সুস্থ ব্যক্তির অনুনাসিক সোয়াব নমুনা ব্যবহার করে ক্লিনিকাল ট্রায়ালের ফলাফলগুলি ফ্লুরোসেন্স তীব্রতা এবং স্ট্যান্ডার্ড RT-PCR (পিয়ারসনের সহগ > 0.9) এর মধ্যে ভাল চুক্তি দেখায়।একটি FAST-POCT ডিভাইসের আনুমানিক উপাদান ব্যয় প্রায় US$1 (পরিপূরক সারণী 1) এবং বড় আকারের উত্পাদন পদ্ধতি (যেমন ইনজেকশন ছাঁচনির্মাণ) ব্যবহার করে আরও হ্রাস করা যেতে পারে।প্রকৃতপক্ষে, FAST-ভিত্তিক POCT ডিভাইসগুলিতে WHO দ্বারা বাধ্যতামূলক সমস্ত প্রয়োজনীয় বৈশিষ্ট্য রয়েছে এবং নতুন জৈব রাসায়নিক পরীক্ষা পদ্ধতি যেমন প্লাজমা থার্মাল সাইক্লিং 44, পরিবর্ধন-মুক্ত ইমিউনোসেস45 এবং ন্যানোবডি ফাংশনালাইজেশন টেস্ট46 এর সাথে সামঞ্জস্যপূর্ণ যা POCT সিস্টেমের মেরুদণ্ড।সম্ভাবনা
ডুমুর উপর.1a FAST-POCT প্ল্যাটফর্মের গঠন দেখায়, যা চারটি তরল চেম্বার নিয়ে গঠিত: একটি প্রাক-সংরক্ষণ চেম্বার, একটি মিক্সিং চেম্বার, একটি প্রতিক্রিয়া চেম্বার এবং একটি বর্জ্য চেম্বার।তরল প্রবাহ নিয়ন্ত্রণের চাবিকাঠি হল ফাস্ট ডিজাইন (ইলাস্টিক মেমব্রেন, লিভার এবং ব্লক সমন্বিত) যা প্রাক-স্টোরেজ চেম্বার এবং মিক্সিং চেম্বারে অবস্থিত।একটি বায়ুমণ্ডলীয়ভাবে কার্যকর পদ্ধতি হিসাবে, FAST নকশাটি বন্ধ/খোলা সুইচিং, বহুমুখী ডোজ, অন-ডিমান্ড ফ্লুইড রিলিজ, নির্ভরযোগ্য অপারেশন (যেমন, পরিবেশগত কম্পনের প্রতি সংবেদনশীলতা) এবং দীর্ঘমেয়াদী স্টোরেজ সহ সুনির্দিষ্ট তরল প্রবাহ নিয়ন্ত্রণ প্রদান করে।FAST-POCT প্ল্যাটফর্মটি চারটি স্তর নিয়ে গঠিত: একটি ব্যাকিং লেয়ার, একটি ইলাস্টিক ফিল্ম লেয়ার, একটি প্লাস্টিকের ফিল্ম লেয়ার এবং একটি কভার লেয়ার, যেমনটি চিত্র 1b-এ একটি বর্ধিত দৃশ্যে দেখানো হয়েছে (পরিপূরক চিত্র S1 এবং S2 এও বিস্তারিতভাবে দেখানো হয়েছে) )সমস্ত চ্যানেল এবং তরল পরিবহন চেম্বার (যেমন প্রাক-সঞ্চয়স্থান এবং প্রতিক্রিয়া চেম্বার) 0.2 মিমি (সবচেয়ে পাতলা অংশ) থেকে 5 মিমি পুরু পর্যন্ত পিএলএ (পলিল্যাকটিক অ্যাসিড) সাবস্ট্রেটে এম্বেড করা হয়।ইলাস্টিক ফিল্ম উপাদান হল একটি 300 µm পুরু পিডিএমএস যা "পাতলা পুরুত্ব" এবং স্থিতিস্থাপকতার কম মডুলাস (প্রায় 2.25 MPa47) এর কারণে বায়ুচাপ প্রয়োগ করা হলে সহজেই প্রসারিত হয়।পলিথিন ফিল্ম স্তরটি পলিথিন টেরেফথালেট (PET) দিয়ে তৈরি করা হয় যার পুরুত্ব 100 µm হয় যাতে বায়ুচাপের কারণে ইলাস্টিক ফিল্মকে অত্যধিক বিকৃতি থেকে রক্ষা করা যায়।চেম্বারগুলির সাথে সঙ্গতিপূর্ণ, সাবস্ট্রেট স্তরটিতে তরল প্রবাহ নিয়ন্ত্রণ করতে কভার স্তরের সাথে (পিএলএ তৈরি) লিভার সংযুক্ত থাকে।ইলাস্টিক ফিল্মটি ডবল-পার্শ্বযুক্ত আঠালো টেপ (ARseal 90880) ব্যবহার করে ব্যাকিং লেয়ারে আঠালো এবং একটি প্লাস্টিকের ফিল্ম দিয়ে ঢেকে দেওয়া হয়েছিল।কভার লেয়ারে একটি টি-ক্লিপ ডিজাইন ব্যবহার করে একটি সাবস্ট্রেটে তিনটি স্তর একত্র করা হয়েছিল।টি-ক্ল্যাম্পের দুই পায়ের মধ্যে ফাঁক থাকে।যখন ক্লিপটি খাঁজে ঢোকানো হয়, তখন দুটি পা সামান্য বাঁকানো হয়, তারপরে তাদের আসল অবস্থায় ফিরে আসে এবং খাঁজের মধ্য দিয়ে যাওয়ার সময় ঢাকনা এবং ব্যাকিংকে শক্তভাবে আবদ্ধ করে (পরিপূরক চিত্র S1)।চারটি স্তর তারপর সংযোগকারী ব্যবহার করে একত্রিত করা হয়।
প্ল্যাটফর্মের স্কিম্যাটিক ডায়াগ্রাম FAST-এর বিভিন্ন কার্যকরী অংশ এবং বৈশিষ্ট্যগুলিকে চিত্রিত করে।b FAST-POCT প্ল্যাটফর্মের বর্ধিত চিত্র।c একটি ইউএস কোয়ার্টার ডলারের মুদ্রার পাশের প্ল্যাটফর্মের ছবি।
FAST-POCT প্ল্যাটফর্মের কার্যপ্রণালী চিত্র 2-এ দেখানো হয়েছে। মূল উপাদানগুলি হল বেস লেয়ারের ব্লক এবং কভার লেয়ারের কব্জাগুলি, যার ফলে একটি হস্তক্ষেপ ডিজাইন তৈরি হয় যখন চারটি স্তর একটি T-আকৃতি ব্যবহার করে একত্রিত হয়। .যখন কোন বায়ুচাপ প্রয়োগ করা হয় না (চিত্র 2a), হস্তক্ষেপ ফিট কব্জাটিকে বাঁকানো এবং বিকৃত করে তোলে এবং ব্লকের বিরুদ্ধে ইলাস্টিক ফিল্মটি চাপতে লিভারের মাধ্যমে একটি সিলিং বল প্রয়োগ করা হয় এবং সীল গহ্বরের তরল সংজ্ঞায়িত করা হয় একটি সিল রাষ্ট্র হিসাবে।এটি লক্ষ করা উচিত যে এই অবস্থায়, লিভারটি বাইরের দিকে বাঁকানো হয়, যেমনটি চিত্র 2a-তে সাইড ভিউতে দেখানো হয়েছে।যখন বায়ু সরবরাহ করা হয় (চিত্র 2b), ইলাস্টিক ঝিল্লিটি কভারের দিকে বাইরের দিকে প্রসারিত হয় এবং লিভারকে উপরে ঠেলে দেয়, এইভাবে পরবর্তী চেম্বারে তরল প্রবাহের জন্য লিভার এবং ব্লকের মধ্যে একটি ফাঁক খুলে দেয়, যা একটি উন্মুক্ত অবস্থা হিসাবে সংজ্ঞায়িত হয়। .বায়ুচাপ মুক্ত হওয়ার পরে, লিভারটি তার আসল অবস্থানে ফিরে আসতে পারে এবং কব্জাটির স্থিতিস্থাপকতার কারণে শক্ত থাকতে পারে।লিভার আন্দোলনের ভিডিওগুলি সম্পূরক মুভি S1 এ উপস্থাপিত হয়েছে।
A. বন্ধ থাকা অবস্থায় পরিকল্পিত চিত্র এবং ফটোগ্রাফ।চাপের অনুপস্থিতিতে, লিভারটি ব্লকের বিরুদ্ধে ঝিল্লিকে চাপ দেয় এবং তরলটি সিল করা হয়।খ ভাল অবস্থায়।যখন চাপ প্রয়োগ করা হয়, ঝিল্লি প্রসারিত হয় এবং লিভারকে উপরে ঠেলে দেয়, তাই চ্যানেলটি খোলে এবং তরল প্রবাহিত হতে পারে।c সমালোচনামূলক চাপের বৈশিষ্ট্যগত আকার নির্ধারণ করুন।বৈশিষ্ট্যগত মাত্রার মধ্যে রয়েছে লিভারের দৈর্ঘ্য (L), স্লাইডার এবং কব্জা (l) এর মধ্যে দূরত্ব এবং লিভার প্রোট্রুশন (t) এর পুরুত্ব।Fs হল থ্রোটল পয়েন্ট B-এ কম্প্যাকশন বল। q হল লিভারে সমানভাবে বিতরণ করা লোড।Tx* হিংড লিভার দ্বারা বিকশিত টর্কের প্রতিনিধিত্ব করে।জটিল চাপ হল লিভার বাড়াতে এবং তরল প্রবাহের জন্য প্রয়োজনীয় চাপ।d সমালোচনামূলক চাপ এবং উপাদান আকারের মধ্যে সম্পর্কের তাত্ত্বিক এবং পরীক্ষামূলক ফলাফল।n = 6টি স্বাধীন পরীক্ষা-নিরীক্ষা করা হয়েছিল এবং ডেটা ± আদর্শ বিচ্যুতি হিসাবে দেখানো হয়েছে।কাঁচা ডেটা কাঁচা ডেটা ফাইল হিসাবে উপস্থাপন করা হয়।
জ্যামিতিক পরামিতিগুলির উপর ফাঁকটি খোলা হয় এমন গুরুত্বপূর্ণ চাপ Pc-এর নির্ভরতা বিশ্লেষণ করার জন্য বীম তত্ত্বের উপর ভিত্তি করে একটি বিশ্লেষণাত্মক মডেল তৈরি করা হয়েছে (উদাহরণস্বরূপ, L হল লিভারের দৈর্ঘ্য, l হল ব্লক এবং এর মধ্যে দূরত্ব। কব্জা, S হল লিভার তরল টি-এর সাথে যোগাযোগের ক্ষেত্র হল লিভার প্রোট্রুশনের পুরুত্ব, যেমনটি চিত্র 2c-এ দেখানো হয়েছে)।পরিপূরক নোট এবং পরিপূরক চিত্র S3-এ বিশদ বিবরণ অনুসারে, ফাঁকটি খোলে যখন \({P}_{c}\ge \frac{2{F}_{s}l}{SL}\), যেখানে Fs হল টর্ক \ ({T}_{x}^{\ast}(={F}_{s}l)\) একটি হস্তক্ষেপ ফিটের সাথে যুক্ত বলগুলিকে নির্মূল করতে এবং কব্জাটিকে বাঁকানোর জন্য।পরীক্ষামূলক প্রতিক্রিয়া এবং বিশ্লেষণাত্মক মডেলটি ভাল চুক্তি দেখায় (চিত্র 2d), দেখায় যে ক্রমবর্ধমান t/l এবং হ্রাসের সাথে Pc বৃদ্ধি পায়, যা ক্লাসিক্যাল বিম মডেল দ্বারা সহজে ব্যাখ্যা করা যায়, অর্থাৎ t/Lift এর সাথে টর্ক বৃদ্ধি পায়। .এইভাবে, আমাদের তাত্ত্বিক বিশ্লেষণ স্পষ্টভাবে দেখায় যে লিভারের দৈর্ঘ্য L এবং t/l অনুপাত সামঞ্জস্য করে সমালোচনামূলক চাপ কার্যকরভাবে নিয়ন্ত্রণ করা যেতে পারে, যা FAST-POCT প্ল্যাটফর্মের নকশার জন্য একটি গুরুত্বপূর্ণ ভিত্তি প্রদান করে।
FAST-POCT প্ল্যাটফর্ম বহুমুখী বিতরণ প্রদান করে (ইনসেট এবং পরীক্ষা সহ চিত্র 3a তে দেখানো হয়েছে), যা সফল POCT-এর সবচেয়ে গুরুত্বপূর্ণ বৈশিষ্ট্য, যেখানে তরলগুলি যে কোনও দিকে এবং যে কোনও ক্রমে প্রবাহিত হতে পারে (ক্যাসকেড, যুগপত, অনুক্রমিক) বা নির্বাচনী মাল্টিচ্যানেল। বিতরণ- ডোজ ফাংশন।ডুমুর উপর.3a(i) একটি ক্যাসকেডেড ডোজিং মোড দেখায় যেখানে দুটি বা ততোধিক চেম্বারগুলি বিভিন্ন বিক্রিয়াকে আলাদা করার জন্য ব্লক ব্যবহার করে এবং খোলা এবং বন্ধ অবস্থা নিয়ন্ত্রণ করার জন্য একটি লিভার ব্যবহার করে ক্যাসকেড করা হয়।চাপ প্রয়োগ করা হলে, তরল একটি ক্যাসকেড পদ্ধতিতে উপরের থেকে নীচের চেম্বারে প্রবাহিত হয়।এটি লক্ষ করা উচিত যে ক্যাসকেড চেম্বারগুলি ভিজা রাসায়নিক বা শুকনো রাসায়নিক যেমন লাইওফিলাইজড পাউডার দিয়ে পূর্ণ হতে পারে।চিত্র 3a(i) এর পরীক্ষায়, উপরের চেম্বার থেকে লাল কালি নীল ডাই পাউডার (কপার সালফেট) সহ দ্বিতীয় চেম্বারে প্রবাহিত হয় এবং নীচের চেম্বারে পৌঁছালে গাঢ় নীল হয়ে যায়।এটি তরল পাম্প করার জন্য নিয়ন্ত্রণ চাপও দেখায়।একইভাবে, যখন একটি লিভার দুটি চেম্বারের সাথে সংযুক্ত থাকে, তখন এটি একযোগে ইনজেকশন মোড হয়ে যায়, যেমনটি চিত্রে দেখানো হয়েছে।3a(ii), যেখানে চাপ প্রয়োগ করা হলে তরল দুটি বা ততোধিক চেম্বারে সমানভাবে বিতরণ করা যেতে পারে।যেহেতু জটিল চাপ লিভারের দৈর্ঘ্যের উপর নির্ভর করে, তাই ডুমুরে দেখানো হিসাবে একটি অনুক্রমিক ইনজেকশন প্যাটার্ন অর্জন করতে লিভারের দৈর্ঘ্য সামঞ্জস্য করা যেতে পারে।3a(iii)।একটি লং লিভার (গুরুত্বপূর্ণ চাপের সাথে Pc_long) চেম্বার B এর সাথে সংযুক্ত ছিল এবং একটি ছোট লিভার (গুরুত্বপূর্ণ চাপের সাথে Pc_short > Pc_long) চেম্বার A এর সাথে সংযুক্ত ছিল। চাপ P1 (Pc_long < P1 < Pc_short) প্রয়োগ করা হয়েছিল, শুধুমাত্র লাল তরল চেম্বার B তে প্রবাহিত হতে পারে এবং যখন চাপ P2 (> Pc_short) তে বাড়ানো হয়, তখন নীল তরল চেম্বার A-তে প্রবাহিত হতে পারে। এই ক্রমিক ইনজেকশন মোডটি ক্রমানুসারে তাদের সম্পর্কিত চেম্বারে স্থানান্তরিত বিভিন্ন তরলগুলিতে প্রযোজ্য, যা একটি সফল POCT-এর জন্য গুরুত্বপূর্ণ যন্ত্র.একটি লং লিভার (গুরুত্বপূর্ণ চাপের সাথে Pc_long) চেম্বার B এর সাথে সংযুক্ত ছিল এবং একটি ছোট লিভার (গুরুত্বপূর্ণ চাপের সাথে Pc_short > Pc_long) চেম্বার A এর সাথে সংযুক্ত ছিল। চাপ P1 (Pc_long < P1 < Pc_short) প্রয়োগ করা হয়েছিল, শুধুমাত্র লাল তরল চেম্বার B তে প্রবাহিত হতে পারে এবং যখন চাপ P2 (> Pc_short) তে বাড়ানো হয়, তখন নীল তরল চেম্বার A-তে প্রবাহিত হতে পারে। এই ক্রমিক ইনজেকশন মোডটি ক্রমানুসারে তাদের সম্পর্কিত চেম্বারে স্থানান্তরিত বিভিন্ন তরলগুলিতে প্রযোজ্য, যা একটি সফল POCT-এর জন্য গুরুত্বপূর্ণ যন্ত্র.Длинный рычаг (с критическим давлением Pc_long) был соединен с камерой B, а короткий рычаг (с критическим давcлением Pc_long Pc_long) с камерой A. При приложении давления P1 (Pc_long < P1 < Pc_short) только жидкость, выделенная красным может течь в ক্যামেরু বি, এবং когда давление было увеличено до P2 (> Pc_short), синяя жидкость может течь в камеру A я к различным жидкостям, последовательно перемещаемым в соответствующие камеры, что имеет решающее значение дл.একটি দীর্ঘ লিভার (গুরুত্বপূর্ণ চাপের সাথে Pc_long) চেম্বার B এর সাথে সংযুক্ত ছিল, এবং একটি ছোট লিভার (গুরুত্বপূর্ণ চাপের সাথে Pc_short > Pc_long) চেম্বার A এর সাথে সংযুক্ত ছিল। যখন চাপ P1 (Pc_long < P1 < Pc_short) প্রয়োগ করা হয়, তখন শুধুমাত্র তরলটি হাইলাইট করা হয়। লাল রঙে চেম্বার B তে প্রবাহিত হতে পারে, এবং যখন চাপ P2 (> Pc_short) তে বাড়ানো হয়, তখন নীল তরল চেম্বার A-তে প্রবাহিত হতে পারে। এই ক্রমিক ইনজেকশন মোডটি বিভিন্ন তরলগুলিতে ক্রমানুসারে সংশ্লিষ্ট চেম্বারে স্থানান্তরিত হয়, যা গুরুতর সফল POCT এর জন্য।যন্ত্র. Длинный рычаг (критическое давление Pc_long) соединен с камерой B, а короткий рычаг (критическое давление Pc_short) > Pc_long.দীর্ঘ বাহু (গুরুত্বপূর্ণ চাপ Pc_long) চেম্বার B এর সাথে সংযুক্ত এবং ছোট হাত (গুরুত্বপূর্ণ চাপ Pc_short > Pc_long) চেম্বার A এর সাথে সংযুক্ত।При приложении давления P1 (Pc_long < P1 < Pc_short) একটি может поступать синяя жидкость.যখন চাপ P1 (Pc_long < P1 < Pc_short) প্রয়োগ করা হয়, তখন শুধুমাত্র লাল তরল চেম্বারে B প্রবেশ করতে পারে এবং যখন চাপ P2 (> Pc_short) এ বাড়ানো হয়, তখন নীল তরল চেম্বারে A প্রবেশ করতে পারে। এই ক্রমিক ইনজেকশন মোডটি অনুক্রমিক স্থানান্তরের জন্য উপযুক্ত। সংশ্লিষ্ট চেম্বারে বিভিন্ন তরল, যা POCT ডিভাইসের সফল অপারেশনের জন্য গুরুত্বপূর্ণ।চিত্র 3a(iv) নির্বাচনী ইনজেকশন মোড প্রদর্শন করে, যেখানে প্রধান চেম্বারে একটি ছোট (গুরুত্বপূর্ণ চাপ সহ Pc_short) এবং একটি দীর্ঘ লিভার (গুরুত্বপূর্ণ চাপের সাথে Pc_long < Pc_short) ছিল যা যথাক্রমে চেম্বার A এবং চেম্বার B এর সাথে সংযুক্ত ছিল। চেম্বার B-এর সাথে সংযুক্ত অন্য একটি এয়ার চ্যানেলে। প্রথমে A চেম্বারে তরল স্থানান্তর করতে, একই সময়ে ডিভাইসে P1 (Pc_long < P1 < Pc_short) এবং P2 (P2 > P1) এর সাথে P1 + P2 > Pc_short চাপ দিন।চিত্র 3a(iv) নির্বাচনী ইনজেকশন মোড প্রদর্শন করে, যেখানে প্রধান চেম্বারে একটি ছোট (গুরুত্বপূর্ণ চাপ সহ Pc_short) এবং একটি দীর্ঘ লিভার (গুরুত্বপূর্ণ চাপের সাথে Pc_long < Pc_short) ছিল যা যথাক্রমে চেম্বার A এবং চেম্বার B এর সাথে সংযুক্ত ছিল। চেম্বার B-এর সাথে সংযুক্ত অন্য একটি এয়ার চ্যানেলে। প্রথমে A চেম্বারে তরল স্থানান্তর করতে, একই সময়ে ডিভাইসে P1 (Pc_long < P1 < Pc_short) এবং P2 (P2 > P1) এর সাথে P1 + P2 > Pc_short চাপ দিন।ডুমুর উপর.3a(iv) показан режим селективного впрыска, при котором основная камера имела короткий (с критическим давлением Pc_short) давлением Pc_long < Pc_short), которые дополнительно соединялись с камерой A এবং камерой B соответственно.3a(iv) নির্বাচনী ইনজেকশন মোড দেখায়, যেখানে প্রধান চেম্বারে একটি ছোট (গুরুত্বপূর্ণ চাপ সহ Pc_short) এবং একটি দীর্ঘ লিভার (গুরুত্বপূর্ণ চাপের সাথে Pc_long < Pc_short) ছিল, যা যথাক্রমে চেম্বার A এবং চেম্বার B এর সাথে সংযুক্ত ছিল।к другому воздушному каналу, соединенному с камерой B. Чтобы сначала передать жидкость в камеру A, к устройствыминому каналу (Pc_long < P1 < Pc_short) এবং P2 (P2 > P1), где P1 + P2 > Pc_short।চেম্বার B এর সাথে সংযুক্ত অন্য একটি এয়ার চ্যানেলে। প্রথমে A চেম্বারে তরল স্থানান্তর করতে, P1 (Pc_long < P1 < Pc_short) এবং P2 (P2 > P1) চাপগুলি একই সাথে ডিভাইসে প্রয়োগ করা হয়েছিল, যেখানে P1 + P2 > Pc_short। 3a(iv) показан режим селективного впрыска, когда основная камера имеет короткий стержень (с критическим давлением давлением давлением давлением) тическим давлением Pc_long < Pc_short), соединенные с камерой A и камерой B соответственно, и в дополнение к другомудумукаму подключенному к комнате B.3a(iv) সিলেক্টিভ ইনজেকশন মোড দেখায় যখন প্রধান চেম্বারে একটি ছোট স্টেম (গুরুত্বপূর্ণ চাপ Pc_short) এবং একটি দীর্ঘ স্টেম (গুরুত্বপূর্ণ চাপ Pc_long < Pc_short) যথাক্রমে চেম্বার A এবং চেম্বার B এর সাথে সংযুক্ত থাকে এবং অন্য একটি বায়ু পথের সাথে সংযুক্ত থাকে। রুম B এর সাথে সংযুক্ত.এইভাবে, P2 তরলকে চেম্বারে B প্রবেশ করতে বাধা দেয়;এদিকে, মোট চাপ P1 + P2 চেম্বার A-তে তরল প্রবাহের অনুমতি দেওয়ার জন্য চেম্বার A এর সাথে সংযুক্ত ছোট লিভারটিকে সক্রিয় করার গুরুতর চাপকে ছাড়িয়ে গেছে। তারপর, যখন চেম্বার B পূরণ করার প্রয়োজন ছিল, তখন আমাদের শুধুমাত্র P1 প্রয়োগ করতে হবে (Pc_long < P1 < Pc_short) প্রধান চেম্বারে লং লিভার সক্রিয় করতে এবং তরলকে চেম্বারে প্রবাহিত করার অনুমতি দেয়। এটা স্পষ্টভাবে লক্ষ্য করা যায় যে t = 3 সেকেন্ড থেকে 9 সেকেন্ড পর্যন্ত চেম্বারে তরলটি স্থির থাকে যখন এটি চেম্বারে বৃদ্ধি পায়। B যখন চাপ P1 প্রয়োগ করা হয়েছিল।এদিকে, মোট চাপ P1 + P2 চেম্বার A-তে তরল প্রবাহের অনুমতি দেওয়ার জন্য চেম্বার A এর সাথে সংযুক্ত ছোট লিভারটিকে সক্রিয় করার গুরুতর চাপকে ছাড়িয়ে গেছে। তারপর, যখন চেম্বার B পূরণ করার প্রয়োজন ছিল, তখন আমাদের শুধুমাত্র P1 প্রয়োগ করতে হবে (Pc_long < P1 < Pc_short) প্রধান চেম্বারে লং লিভার সক্রিয় করতে এবং তরলকে চেম্বারে প্রবাহিত করার অনুমতি দেয়। এটা স্পষ্টভাবে লক্ষ্য করা যায় যে t = 3 সেকেন্ড থেকে 9 সেকেন্ড পর্যন্ত চেম্বারে তরলটি স্থির থাকে যখন এটি চেম্বারে বৃদ্ধি পায়। B যখন চাপ P1 প্রয়োগ করা হয়েছিল।Между тем, общее давление P1 + P2 превысило критическое давление, чтобы активировать более короткий рычаг, сноевказой рычаг лить жидкости течь в камеру A. ). дкость в камере একটি оставалась постоянной, в то время как в камере она увеличивалась.এদিকে, মোট চাপ P1 + P2 চেম্বার A-তে তরলকে প্রবাহিত করার অনুমতি দেওয়ার জন্য চেম্বার A এর সাথে সংযুক্ত একটি ছোট লিভার সক্রিয় করার গুরুতর চাপকে ছাড়িয়ে গেছে। তারপর যখন চেম্বার B পূরণ করতে হবে, তখন আমাদের শুধুমাত্র P1 প্রয়োগ করতে হবে (Pc_long < P1) < Pc_short ) প্রধান চেম্বারে লং লিভার সক্রিয় করুন এবং তরলকে চেম্বারে প্রবাহিত করতে দিন। এটা স্পষ্টভাবে লক্ষ্য করা যায় যে t = 3 s এবং 9 s এর মধ্যে চেম্বার A-তে তরল স্থির থাকে, যখন চেম্বারে এটি বৃদ্ধি পায়।B যখন চাপ P1 প্রয়োগ করা হয়।একই সময়ে, মোট চাপ P1 + P2 গুরুতর চাপকে ছাড়িয়ে যায়, ছোট লিভার সংযোগকারী চেম্বার A কে সক্রিয় করে, তরলকে চেম্বার A তে প্রবাহিত হতে দেয়।যখন চেম্বার A পূরণ করার সময় হয়, আমরা কেবল প্রধান চেম্বারে P1 এবং সেকেন্ডারি চেম্বারে P2 প্রয়োগ করি।এইভাবে, প্রবাহ আচরণকে বেছে বেছে ক্যামেরা A এবং B-এর মধ্যে পরিবর্তন করা যেতে পারে। চারটি বহু-কার্যকরী বিতরণ মোডের প্রবাহ আচরণ সম্পূরক চলচ্চিত্র S2-তে পাওয়া যাবে।
বহুমুখী অ্যাসাইনমেন্টের একটি চিত্র, যেমন (i) ক্যাসকেডিং, (ii) একযোগে, (iii) অনুক্রমিক, এবং (iv) নির্বাচনী অ্যাসাইনমেন্ট৷বক্ররেখাগুলি এই চারটি বিতরণ মোডের কার্যপ্রবাহ এবং পরামিতিগুলিকে উপস্থাপন করে।b ডিওনাইজড জল এবং ইথানলে দীর্ঘমেয়াদী স্টোরেজ পরীক্ষার ফলাফল।n = 5টি স্বাধীন পরীক্ষা করা হয়েছিল এবং ডেটা ± sd c হিসাবে দেখানো হয়েছে।স্থায়িত্ব পরীক্ষা প্রদর্শন যখন FAST ডিভাইস এবং কৈশিক ভালভ (CV) ডিভাইসটি (i) স্থির এবং (ii) স্পন্দিত অবস্থায় ছিল।(iii) বিভিন্ন কৌণিক ফ্রিকোয়েন্সিতে FAST এবং CV ডিভাইসের জন্য ভলিউম বনাম সময়।d (i) ফাস্ট ডিভাইস এবং (ii) সিভি ডিভাইসের চাহিদা অনুযায়ী পরীক্ষার ফলাফল প্রকাশ।(iii) বিরতিহীন চাপ মোড ব্যবহার করে FAST এবং CV ডিভাইসগুলির জন্য ভলিউম এবং সময়ের মধ্যে সম্পর্ক।সমস্ত স্কেল বার, 1 সেমি।কাঁচা ডেটা কাঁচা ডেটা ফাইল হিসাবে সরবরাহ করা হয়।
বিকারকগুলির দীর্ঘমেয়াদী স্টোরেজ একটি সফল POCT ডিভাইসের আরেকটি গুরুত্বপূর্ণ বৈশিষ্ট্য যা অপ্রশিক্ষিত কর্মীদের একাধিক রিএজেন্ট পরিচালনা করার অনুমতি দেবে।যদিও অনেক প্রযুক্তি দীর্ঘমেয়াদী স্টোরেজের জন্য তাদের সম্ভাব্যতা দেখিয়েছে (যেমন, 35টি মাইক্রোডিসপেনসার, 48টি ব্লিস্টার প্যাক, এবং 49টি স্টিক প্যাক), প্যাকেজটি মিটমাট করার জন্য একটি ডেডিকেটেড রিসিভিং কম্পার্টমেন্ট প্রয়োজন, যা খরচ এবং জটিলতা বাড়ায়;অধিকন্তু, এই স্টোরেজ মেকানিজম অন-ডিমান্ড ডিসপেনসিংয়ের অনুমতি দেয় না এবং প্যাকেজিংয়ে অবশিষ্ট থাকার কারণে রিএজেন্টের অপচয় হয়।দীর্ঘমেয়াদী স্টোরেজ ক্ষমতা সিএনসি-মেশিনযুক্ত পিএমএমএ উপাদান ব্যবহার করে একটি ত্বরান্বিত জীবন পরীক্ষা পরিচালনা করে যাচাই করা হয়েছিল এর সামান্য রুক্ষতা এবং গ্যাসের প্রবেশের প্রতিরোধের কারণে (পরিপূরক চিত্র S5)।পরীক্ষার যন্ত্রটি 9 দিনের জন্য 65 ডিগ্রি সেলসিয়াসে ডিওনাইজড জল (ডিওনাইজড জল) এবং 70% ইথানল (সিমুলেটিং উদ্বায়ী বিকারক) দিয়ে ভরা ছিল।ডিওনাইজড জল এবং ইথানল উভয়ই উপরে থেকে অ্যাক্সেস ব্লক করতে অ্যালুমিনিয়াম ফয়েল ব্যবহার করে সংরক্ষণ করা হয়েছিল।সাহিত্যে রিপোর্ট করা আরহেনিয়াস সমীকরণ এবং অনুপ্রবেশ সক্রিয়করণ শক্তি 50,51 রিয়েল-টাইম সমতুল্য গণনা করতে ব্যবহৃত হয়েছিল।ডুমুর উপর.3b 5টি নমুনার গড় ওজন কমানোর ফলাফল দেখায় যা 65°C তাপমাত্রায় 9 দিনের জন্য সংরক্ষণ করা হয়, ডিওনাইজড জলের জন্য 0.30% এবং 23°C তাপমাত্রায় 2 বছর ধরে 70% ইথানলের জন্য 0.72% এর সমতুল্য।
ডুমুর উপর.3c কম্পন পরীক্ষা দেখায়।যেহেতু বিদ্যমান POCT28,29 ডিভাইসগুলির মধ্যে কৈশিক ভালভ (CV) হল সবচেয়ে জনপ্রিয় তরল হ্যান্ডলিং পদ্ধতি, তাই তুলনা করার জন্য একটি CV ডিভাইস 300 µm চওড়া এবং 200 µm গভীর ব্যবহার করা হয়েছিল।এটি দেখা যায় যে যখন উভয় ডিভাইসই স্থির থাকে, তখন FAST-POCT প্ল্যাটফর্মের তরল এবং CV ডিভাইসের তরল চ্যানেলের আকস্মিক প্রসারণের কারণে লক আপ হয়, যা কৈশিক শক্তি হ্রাস করে।যাইহোক, অরবিটাল ভাইব্রেটরের কৌণিক ফ্রিকোয়েন্সি বৃদ্ধির সাথে সাথে, FAST-POCT প্ল্যাটফর্মের তরল সিল করা থাকে, কিন্তু CV ডিভাইসের তরল নিম্ন চেম্বারে প্রবাহিত হয় (এছাড়াও পরিপূরক মুভি S3 দেখুন)।এটি পরামর্শ দেয় যে FAST-POCT প্ল্যাটফর্মের বিকৃত কব্জাগুলি চেম্বারে তরলটিকে শক্তভাবে বন্ধ করতে মডিউলটিতে একটি শক্তিশালী যান্ত্রিক শক্তি প্রয়োগ করতে পারে।যাইহোক, সিভি ডিভাইসে, কঠিন, বায়ু এবং তরল পর্যায়গুলির মধ্যে ভারসাম্যের কারণে তরল ধরে রাখা হয়, অস্থিরতা তৈরি করে এবং কম্পন ভারসাম্যকে বিপর্যস্ত করতে পারে এবং অপ্রত্যাশিত প্রবাহ আচরণের কারণ হতে পারে।FAST-POCT প্ল্যাটফর্মের সুবিধা হল এটি নির্ভরযোগ্য কার্যকারিতা প্রদান করে এবং কম্পনের উপস্থিতিতে ব্যর্থতা এড়ায় যা সাধারণত ডেলিভারি এবং অপারেশনের সময় ঘটে।
FAST-POCT প্ল্যাটফর্মের আরেকটি গুরুত্বপূর্ণ বৈশিষ্ট্য হল এর অন-ডিমান্ড রিলিজ, যা পরিমাণগত বিশ্লেষণের জন্য একটি মূল প্রয়োজনীয়তা।ডুমুর উপর.3d FAST-POCT প্ল্যাটফর্ম এবং CV ডিভাইসের অন-ডিমান্ড রিলিজের তুলনা করে।ডুমুর থেকে।3d(iii) আমরা দেখতে পাই যে দ্রুত ডিভাইসটি চাপ সংকেতকে দ্রুত সাড়া দেয়।যখন FAST-POCT প্ল্যাটফর্মে চাপ প্রয়োগ করা হয়, তখন তরল প্রবাহিত হয়, যখন চাপ ছেড়ে দেওয়া হয়, তখন প্রবাহ অবিলম্বে বন্ধ হয়ে যায় (চিত্র 3d(i))।এই ক্রিয়াটি কব্জাটির দ্রুত ইলাস্টিক রিটার্ন দ্বারা ব্যাখ্যা করা যেতে পারে, যা ব্লকের বিপরীতে লিভারকে চাপ দেয়, চেম্বারটি বন্ধ করে দেয়।যাইহোক, CV ডিভাইসে তরল প্রবাহিত হতে থাকে, অবশেষে চাপ প্রকাশের পরে প্রায় 100 μl একটি অপ্রত্যাশিত তরল ভলিউম হয় (চিত্র 3d(ii) এবং পরিপূরক মুভি S4)।এটি প্রথম ইনজেকশনের পরে সিভি সম্পূর্ণ ভিজে যাওয়ার পরে কৈশিক পিনিং প্রভাবের অদৃশ্য হয়ে যাওয়ার দ্বারা ব্যাখ্যা করা যেতে পারে।
একই ডিভাইসে বিভিন্ন ভেজাতা এবং সান্দ্রতার তরল পরিচালনা করার ক্ষমতা POCT অ্যাপ্লিকেশনগুলির জন্য একটি চ্যালেঞ্জ হিসাবে রয়ে গেছে।দুর্বল আর্দ্রতা চ্যানেলগুলিতে ফুটো বা অন্যান্য অপ্রত্যাশিত প্রবাহ আচরণের দিকে নিয়ে যেতে পারে এবং আনুষঙ্গিক সরঞ্জাম যেমন ঘূর্ণি মিক্সার, সেন্ট্রিফিউজ এবং ফিল্টারগুলি প্রায়শই অত্যন্ত সান্দ্র তরল প্রস্তুত করতে প্রয়োজন হয় 52।আমরা সমালোচনামূলক চাপ এবং তরল বৈশিষ্ট্যের মধ্যে সম্পর্ক পরীক্ষা করেছি (বিস্তৃত পরিসরের ভিজাযোগ্যতা এবং সান্দ্রতা সহ)।ফলাফল সারণি 1 এবং ভিডিও S5 দেখানো হয়েছে.এটি দেখা যায় যে বিভিন্ন ভেজাতা এবং সান্দ্রতার তরলগুলি চেম্বারে সিল করা যেতে পারে এবং যখন চাপ প্রয়োগ করা হয়, এমনকি 5500 সিপি পর্যন্ত সান্দ্রতা সহ তরলগুলিও পার্শ্ববর্তী চেম্বারে স্থানান্তরিত হতে পারে, যার ফলে উচ্চ মাত্রার নমুনাগুলি সনাক্ত করা সম্ভব হয়। সান্দ্রতা (অর্থাৎ থুতু, একটি অত্যন্ত সান্দ্র নমুনা যা শ্বাসযন্ত্রের রোগ নির্ণয়ের জন্য ব্যবহৃত হয়)।
উপরের মাল্টিফাংশনাল ডিসপেন্সিং ডিভাইসগুলিকে একত্রিত করে, ফাস্ট-ভিত্তিক POCT ডিভাইসগুলির একটি বিস্তৃত পরিসর তৈরি করা যেতে পারে।একটি উদাহরণ চিত্র 1-এ দেখানো হয়েছে। উদ্ভিদে একটি প্রাক-সংরক্ষণ চেম্বার, একটি মিক্সিং চেম্বার, একটি প্রতিক্রিয়া চেম্বার এবং একটি বর্জ্য চেম্বার রয়েছে।রিএজেন্টগুলি প্রি-স্টোরেজ চেম্বারে বর্ধিত সময়ের জন্য সংরক্ষণ করা যেতে পারে এবং তারপর মিক্সিং চেম্বারে ছেড়ে দেওয়া হয়।সঠিক চাপের সাথে, মিশ্র বিক্রিয়কগুলিকে বেছে বেছে একটি বর্জ্য চেম্বার বা একটি প্রতিক্রিয়া চেম্বারে স্থানান্তর করা যেতে পারে।
যেহেতু PCR সনাক্তকরণ হল H1N1 এবং COVID-19-এর মতো রোগজীবাণু শনাক্ত করার জন্য সোনার মানদণ্ড এবং এতে একাধিক প্রতিক্রিয়া পদক্ষেপ জড়িত, আমরা একটি অ্যাপ্লিকেশন হিসাবে PCR সনাক্তকরণের জন্য FAST-POCT প্ল্যাটফর্ম ব্যবহার করেছি।ডুমুর উপর.4 FAST-POCT প্ল্যাটফর্ম ব্যবহার করে PCR পরীক্ষার প্রক্রিয়া দেখায়।প্রথমত, এলুটিং রিএজেন্ট, ম্যাগনেটিক মাইক্রোবিড রিএজেন্ট, ওয়াশ সলিউশন A এবং ওয়াশ দ্রবণ W যথাক্রমে প্রাক-স্টোরেজ চেম্বার E, M, W1 এবং W2-এ পাইপেট করা হয়েছিল।আরএনএ শোষণের পর্যায়গুলি চিত্রে দেখানো হয়েছে।4a এবং নিম্নরূপ: (1) যখন P1 (=0.26 বার) চাপ প্রয়োগ করা হয়, তখন নমুনাটি M চেম্বারে চলে যায় এবং মিক্সিং চেম্বারে ছেড়ে দেওয়া হয়।(2) বায়ুচাপ P2 (= 0.12 বার) মিক্সিং চেম্বারের নীচে সংযুক্ত পোর্ট A এর মাধ্যমে সরবরাহ করা হয়।যদিও বেশ কিছু মিশ্রণ পদ্ধতি POCT প্ল্যাটফর্মে তরল মেশানোর ক্ষেত্রে তাদের সম্ভাব্যতা দেখিয়েছে (যেমন সার্পেন্টাইন মিক্সিং 53, র্যান্ডম মিক্সিং 54 এবং ব্যাচ মিক্সিং 55), তাদের মিশ্রণের দক্ষতা এবং কার্যকারিতা এখনও সন্তোষজনক নয়।এটি বুদ্বুদ মেশানোর পদ্ধতি গ্রহণ করে, যাতে তরলে বুদবুদ তৈরি করতে মিক্সিং চেম্বারের নীচে বাতাস প্রবর্তিত হয়, যার পরে শক্তিশালী ঘূর্ণি সেকেন্ডের মধ্যে সম্পূর্ণ মিশ্রণ অর্জন করতে পারে।বুদ্বুদ মিশ্রণ পরীক্ষা করা হয়েছিল এবং ফলাফলগুলি পরিপূরক চিত্র S6 এ উপস্থাপিত হয়েছে।এটি দেখা যায় যে যখন 0.10 বারের চাপ প্রয়োগ করা হয়, সম্পূর্ণ মিশ্রণে প্রায় 8 সেকেন্ড সময় লাগে।0.20 বারে চাপ বাড়িয়ে, সম্পূর্ণ মিশ্রণ প্রায় 2 সেকেন্ডের মধ্যে অর্জন করা হয়।মিশ্রণের দক্ষতা গণনা করার পদ্ধতিগুলি পদ্ধতি বিভাগে উপস্থাপন করা হয়েছে।(3) পুঁতি নিষ্কাশন করতে একটি রুবিডিয়াম চুম্বক ব্যবহার করুন, তারপর বর্জ্য চেম্বারে বিকারকগুলি সরানোর জন্য পোর্ট P এর মাধ্যমে P3 (= 0.17 বার) চাপ দিন।ডুমুর উপর.4b,c নিম্নরূপ নমুনা থেকে অমেধ্য অপসারণের জন্য ধোয়ার পদক্ষেপগুলি দেখায়: (1) চেম্বার W1 থেকে ওয়াশিং সলিউশন A চাপ মিক্সিং চেম্বার P1-এ নিঃসৃত হয়।(2) তারপরে বুদ্বুদ মেশানোর প্রক্রিয়াটি করুন।(3) ওয়াশিং দ্রবণ A বর্জ্য তরল চেম্বারে স্থানান্তরিত হয় এবং মিক্সিং চেম্বারের মাইক্রোবিডগুলি চুম্বক দ্বারা টানা হয়।ওয়াশিং W (Fig. 4c) ওয়াশিং A (Fig. 4b) এর অনুরূপ ছিল।এটি লক্ষ করা উচিত যে প্রতিটি ধোয়ার পদক্ষেপ A এবং W দুবার সঞ্চালিত হয়েছিল।চিত্র 4d পুঁতি থেকে আরএনএ নির্গত করার জন্য ইলুশন ধাপগুলি দেখায়;ইলুশন এবং মিক্সিং প্রবর্তন ধাপগুলি উপরে বর্ণিত আরএনএ শোষণ এবং ধোয়ার ধাপগুলির মতোই।P3 এবং P4 (=0.23 বার) চাপের অধীনে ইলুশন রিএজেন্টগুলি পিসিআর প্রতিক্রিয়া চেম্বারে স্থানান্তরিত হওয়ার কারণে, পিসিআর প্রতিক্রিয়া চেম্বারের বাহুকে সীলমোহর করার জন্য সমালোচনামূলক চাপ পৌঁছে যায়।একইভাবে, P4 চাপ বর্জ্য চেম্বারের উত্তরণকে সিল করতে সহায়তা করে।এইভাবে, মাল্টিপ্লেক্স পিসিআর প্রতিক্রিয়াগুলি শুরু করার জন্য সমস্ত ইলিউশন রিএজেন্টগুলি চারটি পিসিআর প্রতিক্রিয়া চেম্বারের মধ্যে সমানভাবে বিতরণ করা হয়েছিল।উপরের পদ্ধতিটি পরিপূরক মুভি S6 এ উপস্থাপিত হয়েছে।
আরএনএ শোষণ ধাপে, নমুনাটি ইনলেট এম-এ প্রবেশ করানো হয় এবং পূর্বে সংরক্ষিত পুঁতির দ্রবণ সহ মিক্সিং চেম্বারে ইনজেকশন দেওয়া হয়।দানাগুলি মিশ্রিত এবং অপসারণের পরে, বিকারকগুলি বর্জ্য চেম্বারে বিতরণ করা হয়।b এবং c ধোয়ার ধাপ, মিক্সিং চেম্বারে বিভিন্ন প্রাক-সংরক্ষিত ওয়াশ রিএজেন্ট প্রবর্তন করুন এবং পুঁতিগুলি মেশানো এবং অপসারণের পরে, বর্জ্য তরল চেম্বারে বিকারকগুলি স্থানান্তর করুন।d ইলিউশন ধাপ: ইলিউশন রিএজেন্ট প্রবর্তন, মিশ্রন এবং গুটিকা নিষ্কাশন করার পরে, বিকারকগুলি পিসিআর প্রতিক্রিয়া চেম্বারে স্থানান্তরিত হয়।বক্ররেখা বিভিন্ন পর্যায়ে কর্মপ্রবাহ এবং সম্পর্কিত পরামিতি দেখায়।চাপ হল স্বতন্ত্র চেম্বারগুলির মাধ্যমে চাপানো চাপ।আয়তন হল মিক্সিং চেম্বারে থাকা তরলের আয়তন।সমস্ত স্কেল বার 1 সেমি।কাঁচা ডেটা কাঁচা ডেটা ফাইল হিসাবে সরবরাহ করা হয়।
একটি পিসিআর পরীক্ষার পদ্ধতি সম্পাদিত হয়েছিল এবং পরিপূরক চিত্র S7 তাপীয় প্রোফাইলগুলি উপস্থাপন করে যার মধ্যে 20 মিনিটের বিপরীত ট্রান্সক্রিপশন সময় এবং 60 মিনিট তাপ সাইক্লিং সময় (95 এবং 60 °C), একটি তাপ চক্র 90 সেকেন্ড (পরিপূরক মুভি S7)।.প্রচলিত RT-PCR (একটি তাপ চক্রের জন্য 180 সেকেন্ড) থেকে FAST-POCT-এর একটি তাপচক্র (90 সেকেন্ড) সম্পূর্ণ করতে কম সময় লাগে।এটি উচ্চ পৃষ্ঠের ক্ষেত্রফল থেকে আয়তনের অনুপাত এবং মাইক্রো-পিসিআর প্রতিক্রিয়া চেম্বারের নিম্ন তাপীয় জড়তা দ্বারা ব্যাখ্যা করা যেতে পারে।চেম্বারের পৃষ্ঠতল হল 96.6 mm2 এবং চেম্বারের আয়তন হল 25 mm3, যার ফলে পৃষ্ঠের আয়তনের অনুপাত প্রায় 3.86 হয়।পরিপূরক চিত্র S10-এ দেখা গেছে, আমাদের প্ল্যাটফর্মের পিসিআর পরীক্ষার ক্ষেত্রে পিছনের প্যানেলে একটি খাঁজ রয়েছে, যা পিসিআর চেম্বারের নীচে 200 µm পুরু করে।একটি তাপীয় পরিবাহী ইলাস্টিক প্যাড তাপমাত্রা নিয়ন্ত্রকের গরম করার পৃষ্ঠের সাথে সংযুক্ত থাকে, যা পরীক্ষার বাক্সের পিছনের সাথে শক্ত যোগাযোগ নিশ্চিত করে।এটি প্ল্যাটফর্মের তাপীয় জড়তা হ্রাস করে এবং গরম/ঠান্ডা করার দক্ষতা উন্নত করে।তাপীয় সাইকেল চালানোর সময়, প্ল্যাটফর্মে এমবেড করা প্যারাফিন গলে যায় এবং পিসিআর প্রতিক্রিয়া চেম্বারে প্রবাহিত হয়, বিকারক বাষ্পীভবন এবং পরিবেশগত দূষণ প্রতিরোধে সিল্যান্ট হিসাবে কাজ করে (দেখুন পরিপূরক মুভি S8)।
উপরে বর্ণিত সমস্ত পিসিআর সনাক্তকরণ প্রক্রিয়াগুলি একটি কাস্টম তৈরি FAST-POCT যন্ত্র ব্যবহার করে সম্পূর্ণ স্বয়ংক্রিয় ছিল, যার মধ্যে একটি প্রোগ্রাম করা চাপ নিয়ন্ত্রণ ইউনিট, একটি চৌম্বক নিষ্কাশন ইউনিট, একটি তাপমাত্রা নিয়ন্ত্রণ ইউনিট এবং একটি ফ্লুরোসেন্ট সংকেত ক্যাপচার এবং প্রক্রিয়াকরণ ইউনিট রয়েছে।লক্ষণীয়, আমরা আরএনএ বিচ্ছিন্নতার জন্য FAST-POCT প্ল্যাটফর্ম ব্যবহার করেছি এবং তারপরে তুলনা করার জন্য FAST-POCT সিস্টেম এবং ডেস্কটপ PCR সিস্টেম ব্যবহার করে PCR প্রতিক্রিয়াগুলির জন্য নিষ্কাশিত RNA নমুনাগুলি ব্যবহার করেছি।পরিপূরক চিত্র S8 এ দেখানো ফলাফলগুলি প্রায় একই ছিল।অপারেটর একটি সাধারণ কাজ সম্পাদন করে: এম-চেম্বারে নমুনাটি প্রবর্তন করে এবং প্ল্যাটফর্মটিকে যন্ত্রের মধ্যে সন্নিবেশ করায়।পরিমাণগত পরীক্ষার ফলাফল প্রায় 82 মিনিটের মধ্যে পাওয়া যায়।FAST-POCT টুলস সম্পর্কে বিস্তারিত তথ্য সম্পূরক চিত্রে পাওয়া যাবে।C9, C10 এবং C11।
ইনফ্লুয়েঞ্জা A (IAV), B (IBV), C (ICV) এবং D (IDV) ভাইরাস দ্বারা সৃষ্ট ইনফ্লুয়েঞ্জা একটি সাধারণ বৈশ্বিক ঘটনা।এর মধ্যে, IAV এবং IBV সবচেয়ে গুরুতর ক্ষেত্রে এবং মৌসুমী মহামারীর জন্য দায়ী, বিশ্বের জনসংখ্যার 5-15% সংক্রামিত হয়, যার ফলে 3-5 মিলিয়ন গুরুতর ঘটনা ঘটে এবং বার্ষিক 290,000-650,000 মৃত্যুর কারণ হয়।শ্বাসযন্ত্রের রোগ 56,57।অসুস্থতা এবং সংশ্লিষ্ট অর্থনৈতিক বোঝা কমাতে IAV এবং IB-এর প্রাথমিক রোগ নির্ণয় অপরিহার্য।উপলব্ধ ডায়াগনস্টিক কৌশলগুলির মধ্যে, বিপরীত ট্রান্সক্রিপ্টেজ পলিমারেজ চেইন প্রতিক্রিয়া (RT-PCR) সবচেয়ে সংবেদনশীল, নির্দিষ্ট এবং সঠিক (>99%)58,59 হিসাবে বিবেচিত হয়।উপলব্ধ ডায়াগনস্টিক কৌশলগুলির মধ্যে, বিপরীত ট্রান্সক্রিপ্টেজ পলিমারেজ চেইন প্রতিক্রিয়া (RT-PCR) সবচেয়ে সংবেদনশীল, নির্দিষ্ট এবং সঠিক (>99%)58,59 হিসাবে বিবেচিত হয়।Среди доступных диагностических методов полимеразная цепная реакция с обратной транскриптазой (ОТ-ПЦР) считаетевлеция чной и точной (> 99%)58,59.উপলব্ধ ডায়গনিস্টিক পদ্ধতিগুলির মধ্যে, বিপরীত ট্রান্সক্রিপ্টেজ পলিমারেজ চেইন প্রতিক্রিয়া (RT-PCR) সবচেয়ে সংবেদনশীল, নির্দিষ্ট এবং সঠিক (> 99%) 58,59 হিসাবে বিবেচিত হয়। Из доступных диагностических методов полимеразная цепная реакция с обратной транскриптазой (ОТ-ПЦР) считаетется считаететсубиная й и точной (>99%)58,59।উপলব্ধ ডায়াগনস্টিক পদ্ধতিগুলির মধ্যে, বিপরীত ট্রান্সক্রিপ্টেজ পলিমারেজ চেইন প্রতিক্রিয়া (RT-PCR) সবচেয়ে সংবেদনশীল, নির্দিষ্ট এবং সঠিক (>99%)58,59 হিসাবে বিবেচিত হয়।যাইহোক, ঐতিহ্যগত RT-PCR পদ্ধতির জন্য বারবার পাইপিং, মিশ্রন, বিতরণ এবং তরল স্থানান্তর প্রয়োজন, সম্পদ-সীমিত সেটিংসে পেশাদারদের দ্বারা তাদের ব্যবহার সীমিত করে।এখানে, FAST-POCT প্ল্যাটফর্মটি যথাক্রমে IAV এবং IBV-এর PCR সনাক্তকরণের জন্য ব্যবহৃত হয়েছিল, তাদের সনাক্তকরণের নিম্ন সীমা (LOD) পেতে।এছাড়াও, IAV এবং IBV প্রজাতির বিভিন্ন প্যাথোটাইপের মধ্যে বৈষম্যের জন্য মাল্টিপ্লেক্স করা হয়েছে, জেনেটিক বিশ্লেষণের জন্য একটি প্রতিশ্রুতিশীল প্ল্যাটফর্ম এবং সঠিকভাবে রোগের চিকিত্সা করার ক্ষমতা প্রদান করে।
ডুমুর উপর.5a নমুনা হিসাবে 150 μl বিশুদ্ধ ভাইরাল RNA ব্যবহার করে HAV PCR পরীক্ষার ফলাফল দেখায়।ডুমুর উপর.5a(i) দেখায় যে 106 কপি/ml-এর HAV ঘনত্বে, ফ্লুরোসেন্স তীব্রতা (ΔRn) 0.830 এ পৌঁছাতে পারে, এবং যখন ঘনত্ব 102 কপি/ml-এ কমে যায়, ΔRn এখনও 0.365 এ পৌঁছাতে পারে, যা তার চেয়ে বেশি অনুরূপ। খালি নেতিবাচক নিয়ন্ত্রণ গ্রুপের (0.002), প্রায় 100 গুণ বেশি।ছয়টি স্বাধীন পরীক্ষার উপর ভিত্তি করে পরিমাপের জন্য, লগ ঘনত্ব এবং IAV (চিত্র 5a(ii)), R2 = 0.993, 102-106 অনুলিপি/mL এর সাইকেল থ্রেশহোল্ড (Ct) এর মধ্যে একটি রৈখিক ক্রমাঙ্কন বক্ররেখা তৈরি করা হয়েছিল।ফলাফলগুলি প্রচলিত RT-PCR পদ্ধতির সাথে ভাল চুক্তিতে রয়েছে।ডুমুর উপর.5a(iii) FAST-POCT প্ল্যাটফর্মের 40টি চক্রের পর পরীক্ষার ফলাফলের ফ্লুরোসেন্ট ছবি দেখায়।আমরা দেখেছি যে FAST-POCT প্ল্যাটফর্ম 102 কপি/mL হিসাবে কম HAV সনাক্ত করতে পারে।যাইহোক, ঐতিহ্যগত পদ্ধতিতে 102 কপি/mL-এ Ct মান নেই, এটি প্রায় 103 কপি/mL-এর LOD তৈরি করে।আমরা অনুমান করেছি যে এটি বুদ্বুদ মেশানোর উচ্চ দক্ষতার কারণে হতে পারে।ঝাঁকুনি মিশ্রণ (প্রচলিত RT-PCR অপারেশনের মতো একই মেশানো পদ্ধতি), শিশি মেশানো (এই পদ্ধতি, 0.12 বারে 3 s) এবং নিয়ন্ত্রণ গোষ্ঠী হিসাবে কোনও মিশ্রণ সহ বিভিন্ন মিশ্রণ পদ্ধতির মূল্যায়ন করার জন্য PCR পরীক্ষা পরীক্ষাগুলি বিশুদ্ধ IAV RNA-তে করা হয়েছিল। ..ফলাফল পরিপূরক চিত্র S12 এ পাওয়া যাবে।এটি দেখা যায় যে একটি উচ্চতর RNA ঘনত্বে (106 কপি/mL), বিভিন্ন মিশ্রণ পদ্ধতির Ct মানগুলি প্রায় বুদবুদ মিশ্রণের মতোই।যখন RNA ঘনত্ব 102 কপি/mL এ নেমে যায়, তখন ঝাঁকুনি মিশ্রণ এবং নিয়ন্ত্রণের কোনো Ct মান ছিল না, যখন বুদবুদ মিশ্রণ পদ্ধতিটি এখনও 36.9 এর Ct মান দেয়, যা 38-এর Ct থ্রেশহোল্ডের নিচে ছিল। ফলাফলগুলি একটি প্রভাবশালী মিশ্রণ বৈশিষ্ট্য দেখায় vesicles, যা অন্যান্য সাহিত্যেও প্রদর্শিত হয়েছে, যা ব্যাখ্যা করতে পারে কেন FAST-POCT প্ল্যাটফর্মের সংবেদনশীলতা প্রচলিত RT-PCR-এর তুলনায় সামান্য বেশি।ডুমুর উপর.5b 101 থেকে 106 কপি/ml পর্যন্ত বিশুদ্ধ IBV RNA নমুনার PCR বিশ্লেষণের ফলাফল দেখায়।ফলাফলগুলি IAV পরীক্ষার অনুরূপ ছিল, R2 = 0.994 এবং 102 কপি/mL এর LOD অর্জন করে।
একটি নেতিবাচক নিয়ন্ত্রণ (NC) হিসাবে TE বাফার ব্যবহার করে 106 থেকে 101 কপি/mL পর্যন্ত IAV ঘনত্ব সহ ইনফ্লুয়েঞ্জা এ ভাইরাস (IAV) এর একটি পিসিআর বিশ্লেষণ।(i) রিয়েল টাইম ফ্লুরোসেন্স বক্ররেখা।(ii) FAST এবং প্রচলিত পরীক্ষার পদ্ধতির জন্য লগারিদমিক IAV RNA ঘনত্ব এবং চক্র থ্রেশহোল্ড (Ct) এর মধ্যে রৈখিক ক্রমাঙ্কন বক্ররেখা।(iii) 40 চক্রের পরে IAV FAST-POCT ফ্লুরোসেন্ট চিত্র।b, (i) রিয়েল-টাইম ফ্লুরোসেন্স স্পেকট্রাম সহ ইনফ্লুয়েঞ্জা বি ভাইরাস (IBV) এর PCR সনাক্তকরণ।(ii) রৈখিক ক্রমাঙ্কন বক্ররেখা এবং (iii) 40 চক্রের পরে FAST-POCT IBV ফ্লুরোসেন্স চিত্র।FAST-POCT প্ল্যাটফর্ম ব্যবহার করে IAV এবং IBV-এর জন্য সনাক্তকরণের নিম্ন সীমা (LOD) ছিল 102 কপি/mL, যা প্রচলিত পদ্ধতি (103 কপি/mL) থেকে কম।গ আইএভি এবং আইবিভির জন্য মাল্টিপ্লেক্স পরীক্ষার ফলাফল।GAPDH একটি ইতিবাচক নিয়ন্ত্রণ হিসাবে ব্যবহৃত হয়েছিল এবং সম্ভাব্য দূষণ এবং পটভূমি পরিবর্ধন রোধ করতে TE বাফার একটি নেতিবাচক নিয়ন্ত্রণ হিসাবে ব্যবহৃত হয়েছিল।চারটি ভিন্ন নমুনার ধরন আলাদা করা যেতে পারে: (1) GAPDH-শুধু নেতিবাচক নমুনা ("IAV-/IBV-");(2) IAV এবং GAPDH এর সাথে IAV সংক্রমণ ("IAV+/IBV-");(3) IBV এবং GAPDH এর সাথে IBV সংক্রমণ ("IAV-/IBV+");(4) IAV/IBV সংক্রমণ ("IAV+/IBV+") IAV, IBV এবং GAPDH এর সাথে।ডটেড লাইন থ্রেশহোল্ড লাইন প্রতিনিধিত্ব করে।n = 6 জৈবিকভাবে স্বাধীন পরীক্ষা করা হয়েছিল, ডেটা ± মান বিচ্যুতি হিসাবে দেখানো হয়েছে।কাঁচা ডেটা কাঁচা ডেটা ফাইল হিসাবে উপস্থাপন করা হয়।
ডুমুর উপর.5c IAV/IBV-এর মাল্টিপ্লেক্সিং পরীক্ষার ফলাফল দেখায়।এখানে, ভাইরাস লাইসেটকে বিশুদ্ধ আরএনএর জায়গায় নমুনা সমাধান হিসাবে ব্যবহার করা হয়েছিল এবং FAST-POCT প্ল্যাটফর্মের চারটি ভিন্ন প্রতিক্রিয়া চেম্বারে IAV, IBV, GAPDH (পজিটিভ কন্ট্রোল) এবং TE বাফার (নেতিবাচক নিয়ন্ত্রণ) এর জন্য চারটি প্রাইমার যুক্ত করা হয়েছিল।সম্ভাব্য দূষণ এবং পটভূমি বর্ধিতকরণ প্রতিরোধ করতে এখানে ইতিবাচক এবং নেতিবাচক নিয়ন্ত্রণ ব্যবহার করা হয়।পরীক্ষাগুলি চারটি গ্রুপে বিভক্ত ছিল: (1) GAPDH- নেতিবাচক নমুনা ("IAV-/IBV-");(2) IAV-সংক্রমিত ("IAV+/IBV-") বনাম IAV এবং GAPDH;(3) IBV-।সংক্রমিত ("IAV-") -/IBV+") IBV এবং GAPDH;(4) IAV/IBV ("IAV+/IBV+") IAV, IBV এবং GAPDH এর সংক্রমণ।ডুমুর উপর.5c দেখায় যে যখন নেতিবাচক নমুনা প্রয়োগ করা হয়েছিল, তখন ইতিবাচক নিয়ন্ত্রণ চেম্বারের ফ্লুরোসেন্স তীব্রতা ΔRn ছিল 0.860, এবং IAV এবং IBV-এর ΔRn নেতিবাচক নিয়ন্ত্রণের (0.002) অনুরূপ ছিল।IAV+/IBV-, IAV-/IBV+ এবং IAV+/IBV+ গোষ্ঠীগুলির জন্য, IAV/GAPDH, IBV/GAPDH এবং IAV/IBV/GAPDH ক্যামেরাগুলি যথাক্রমে উল্লেখযোগ্য ফ্লুরোসেন্স তীব্রতা দেখিয়েছিল, অন্য ক্যামেরাগুলি এমনকি একটি পটভূমিতে প্রতিপ্রভ তীব্রতা দেখায় থার্মাল সাইকেল চালানোর পরে 40 এর স্তর।উপরের পরীক্ষাগুলি থেকে, FAST-POCT প্ল্যাটফর্মটি অসামান্য নির্দিষ্টতা দেখিয়েছে এবং আমাদের একই সাথে বিভিন্ন ইনফ্লুয়েঞ্জা ভাইরাসের প্যাথোটাইপ করার অনুমতি দিয়েছে।
FAST-POCT-এর ক্লিনিকাল প্রযোজ্যতা যাচাই করার জন্য, আমরা IB রোগীদের (n=18) এবং নন-IB কন্ট্রোল (n=18) (চিত্র 6a) থেকে 36টি ক্লিনিকাল নমুনা (নোজ সোয়াব নমুনা) পরীক্ষা করেছি।রোগীর তথ্য পরিপূরক সারণী 3-তে উপস্থাপন করা হয়েছে। আইবি সংক্রমণের অবস্থা স্বাধীনভাবে নিশ্চিত করা হয়েছিল এবং অধ্যয়ন প্রোটোকলটি ঝেজিয়াং ইউনিভার্সিটি ফার্স্ট অ্যাফিলিয়েটেড হাসপাতাল (হ্যাংঝো, ঝেজিয়াং) দ্বারা অনুমোদিত হয়েছিল।রোগীদের প্রতিটি নমুনা দুটি বিভাগে বিভক্ত ছিল।একটি FAST-POCT ব্যবহার করে প্রক্রিয়া করা হয়েছিল এবং অন্যটি একটি ডেস্কটপ PCR সিস্টেম (SLAN-96P, China) ব্যবহার করে প্রক্রিয়া করা হয়েছিল।উভয় অ্যাসেই একই পরিশোধন এবং সনাক্তকরণ কিট ব্যবহার করে।ডুমুর উপর.6b FAST-POCT এবং প্রচলিত রিভার্স ট্রান্সক্রিপশন PCR (RT-PCR) এর ফলাফল দেখায়।আমরা ফ্লুরোসেন্স ইনটেনসিটি (FAST-POCT) কে -log2(Ct) এর সাথে তুলনা করেছি, যেখানে Ct হল প্রচলিত RT-PCR-এর জন্য সাইকেল থ্রেশহোল্ড।দুটি পদ্ধতির মধ্যে ভাল চুক্তি ছিল।FAST-POCT এবং RT-PCR পিয়ারসনের অনুপাত (r) মানের 0.90 (চিত্র 6b) এর সাথে একটি শক্তিশালী ইতিবাচক সম্পর্ক দেখিয়েছে।তারপরে আমরা FAST-POCT এর ডায়গনিস্টিক নির্ভুলতা মূল্যায়ন করেছি।ইতিবাচক এবং নেতিবাচক নমুনার জন্য ফ্লুরোসেন্স তীব্রতা (FL) বিতরণগুলি একটি স্বাধীন বিশ্লেষণাত্মক পরিমাপ (চিত্র 6c) হিসাবে সরবরাহ করা হয়েছিল।আইবি রোগীদের মধ্যে FL মানগুলি নিয়ন্ত্রণের তুলনায় উল্লেখযোগ্যভাবে বেশি ছিল (****P = 3.31 × 10-19; টু-টেইল্ড টি-টেস্ট) (চিত্র 6d)।এর পরে, আইবিভি রিসিভার অপারেটিং বৈশিষ্ট্য (আরওসি) কার্ভগুলি প্লট করা হয়েছিল।আমরা দেখেছি যে ডায়াগনস্টিক নির্ভুলতা খুব ভাল ছিল, 1 এর বক্ররেখার অধীনে একটি এলাকা সহ (চিত্র 6e)।অনুগ্রহ করে মনে রাখবেন যে 2020 সাল পর্যন্ত COVID-19-এর কারণে চীনে বাধ্যতামূলক মাস্ক অর্ডার করার কারণে, আমরা IBD আক্রান্ত রোগীদের সনাক্ত করিনি, তাই সমস্ত ইতিবাচক ক্লিনিকাল নমুনা (অর্থাৎ, অনুনাসিক সোয়াব নমুনা) শুধুমাত্র IBV-এর জন্য ছিল।
ক্লিনিকাল স্টাডি ডিজাইন।18টি রোগীর নমুনা এবং 18টি নন-ইনফ্লুয়েঞ্জা নিয়ন্ত্রণ সহ মোট 36টি নমুনা, FAST-POCT প্ল্যাটফর্ম এবং প্রচলিত RT-PCR ব্যবহার করে বিশ্লেষণ করা হয়েছে।b FAST-POCT PCR এবং প্রচলিত RT-PCR-এর মধ্যে বিশ্লেষণাত্মক ধারাবাহিকতা মূল্যায়ন করুন।ফলাফলগুলি ইতিবাচকভাবে সম্পর্কযুক্ত ছিল (পিয়ারসন r = 0.90)।c 18 IB রোগী এবং 18 টি নিয়ন্ত্রণে ফ্লুরোসেন্সের তীব্রতার মাত্রা।d আইবি রোগীদের মধ্যে (+), এফএল মানগুলি নিয়ন্ত্রণ গ্রুপের তুলনায় উল্লেখযোগ্যভাবে বেশি ছিল (-) (****P = 3.31 × 10-19; টু-টেইলড টি-টেস্ট; n = 36)।প্রতিটি বর্গাকার প্লটের জন্য, কেন্দ্রের কালো মার্কারটি মধ্যকে প্রতিনিধিত্ব করে এবং বাক্সের নীচে এবং উপরের লাইনগুলি যথাক্রমে 25 তম এবং 75 তম পার্সেন্টাইল প্রতিনিধিত্ব করে।হুইস্কারগুলি সর্বনিম্ন এবং সর্বাধিক ডেটা পয়েন্ট পর্যন্ত প্রসারিত হয়, যা বহিরাগত হিসাবে বিবেচিত হয় না।e ROC বক্ররেখা।ডটেড লাইন d ROC বিশ্লেষণ থেকে অনুমান থ্রেশহোল্ড মান উপস্থাপন করে।IBV-এর জন্য AUC হল 1. কাঁচা ডেটা কাঁচা ডেটা ফাইল হিসাবে দেওয়া হয়।
এই নিবন্ধে, আমরা FAST উপস্থাপন করছি, যা একটি আদর্শ POCT-এর জন্য প্রয়োজনীয় বৈশিষ্ট্য রয়েছে।আমাদের প্রযুক্তির সুবিধার মধ্যে রয়েছে: (1) বহুমুখী ডোজিং (ক্যাসকেড, একযোগে, অনুক্রমিক এবং নির্বাচনী), চাহিদা অনুযায়ী মুক্তি (প্রয়োগিত চাপের দ্রুত এবং আনুপাতিক মুক্তি) এবং নির্ভরযোগ্য অপারেশন (150 ডিগ্রিতে কম্পন) (2) দীর্ঘমেয়াদী স্টোরেজ (2 বছর ত্বরান্বিত পরীক্ষার, ওজন হ্রাস প্রায় 0.3%);(3) বিস্তৃত পরিসরের ভেজাবিলিটি এবং সান্দ্রতা সহ তরলগুলির সাথে কাজ করার ক্ষমতা (5500 cP পর্যন্ত সান্দ্রতা);(4) অর্থনৈতিক (FAST-POCT PCR ডিভাইসের আনুমানিক উপাদান খরচ প্রায় US$1)।বহুমুখী ডিসপেনসারকে একত্রিত করে, ইনফ্লুয়েঞ্জা A এবং B ভাইরাসগুলির পিসিআর সনাক্তকরণের জন্য একটি সমন্বিত FAST-POCT প্ল্যাটফর্ম প্রদর্শিত এবং প্রয়োগ করা হয়েছিল।FAST-POCT মাত্র 82 মিনিট সময় নেয়।36টি অনুনাসিক সোয়াব নমুনা সহ ক্লিনিকাল পরীক্ষাগুলি স্ট্যান্ডার্ড RT-PCR (পিয়ারসন সহগ > 0.9) এর সাথে ফ্লুরোসেন্সের তীব্রতার সাথে ভাল সঙ্গতি দেখায়।36টি অনুনাসিক সোয়াব নমুনা সহ ক্লিনিকাল পরীক্ষাগুলি স্ট্যান্ডার্ড RT-PCR (পিয়ারসন সহগ > 0.9) এর সাথে ফ্লুরোসেন্সের তীব্রতার সাথে ভাল সঙ্গতি দেখায়।Клинические тесты с 36 образцами мазков из носа показали хорошее соответствие интенсивности Плуоресценции Плуоресценции стан আইরসোনা > ০,৯)।অনুনাসিক swabs এর 36 টি নমুনার সাথে ক্লিনিকাল পরীক্ষা স্ট্যান্ডার্ড RT-PCR (পিয়ারসনের সহগ > 0.9) এর ফ্লুরোসেন্স তীব্রতার সাথে ভাল চুক্তি দেখায়। RT-PCR Клинические испытания 36 образцов мазков из носа показали хорошее совпадение интенсивности флуоресценции со станоресценции со আইরসোনা > 0,9)।36টি অনুনাসিক সোয়াব নমুনার ক্লিনিকাল পরীক্ষায় স্ট্যান্ডার্ড RT-PCR (পিয়ারসনের সহগ > 0.9) এর সাথে ফ্লুরোসেন্স তীব্রতার ভাল চুক্তি দেখানো হয়েছে।এই কাজের সমান্তরালে, বিভিন্ন উদীয়মান জৈব রাসায়নিক পদ্ধতি (যেমন, প্লাজমা থার্মাল সাইক্লিং, পরিবর্ধন-মুক্ত ইমিউনোসেস, এবং ন্যানোবডি ফাংশনালাইজেশন অ্যাসেস) POCT-তে তাদের সম্ভাব্যতা দেখিয়েছে।যাইহোক, একটি সম্পূর্ণ সমন্বিত এবং শক্তিশালী POCT প্ল্যাটফর্মের অভাবের কারণে, এই পদ্ধতিগুলির জন্য অবশ্যম্ভাবীভাবে পৃথক প্রাক-প্রক্রিয়াকরণ পদ্ধতির প্রয়োজন হয় (যেমন, RNA বিচ্ছিন্নতা44, incubation45 এবং washing46), যা এই পদ্ধতিগুলির সাথে বর্তমান কাজকে আরও পরিপূরক করে উন্নত POCT ফাংশনগুলি বাস্তবায়নের জন্য প্রয়োজনীয় পরামিতি।আনয়ন-ইন-প্রতিক্রিয়া-আউটপুট কর্মক্ষমতা।এই কাজে, যদিও FAST ভালভ সক্রিয় করতে ব্যবহৃত বায়ু পাম্পটি একটি বেঞ্চটপ যন্ত্র (চিত্র S9, S10) এর সাথে একত্রিত হওয়ার জন্য যথেষ্ট ছোট, তবুও এটি উল্লেখযোগ্য শক্তি খরচ করে এবং শব্দ উৎপন্ন করে।নীতিগতভাবে, ছোট ফর্ম ফ্যাক্টর বায়ুসংক্রান্ত পাম্প অন্যান্য উপায়ে প্রতিস্থাপিত করা যেতে পারে, যেমন ইলেক্ট্রোম্যাগনেটিক ফোর্স বা আঙুল অ্যাকচুয়েশন।আরও উন্নতির মধ্যে অন্তর্ভুক্ত থাকতে পারে, উদাহরণস্বরূপ, বিভিন্ন এবং নির্দিষ্ট জৈব রাসায়নিক পরীক্ষাগুলির জন্য কিটগুলিকে অভিযোজিত করা, নতুন সনাক্তকরণ পদ্ধতি ব্যবহার করে যার জন্য গরম/কুলিং সিস্টেমের প্রয়োজন হয় না, এইভাবে পিসিআর অ্যাপ্লিকেশনগুলির জন্য একটি টুল-মুক্ত POCT প্ল্যাটফর্ম প্রদান করে।আমরা বিশ্বাস করি যে FAST প্ল্যাটফর্মটি তরলগুলিকে ম্যানিপুলেট করার একটি উপায় প্রদান করে, আমরা বিশ্বাস করি যে প্রস্তাবিত FAST প্রযুক্তি শুধুমাত্র বায়োমেডিকাল পরীক্ষার জন্য নয়, পরিবেশগত পর্যবেক্ষণ, খাদ্যের গুণমান পরীক্ষা, উপাদান এবং ওষুধের সংশ্লেষণের জন্যও একটি সাধারণ প্ল্যাটফর্ম তৈরি করার সম্ভাবনা উপস্থাপন করে। ..
মানুষের অনুনাসিক সোয়াব নমুনা সংগ্রহ এবং ব্যবহার Zhejiang ইউনিভার্সিটি ফার্স্ট অ্যাফিলিয়েটেড হাসপাতালের (IIT20220330B) নীতিশাস্ত্র কমিটি দ্বারা অনুমোদিত হয়েছে।36টি অনুনাসিক সোয়াব নমুনা সংগ্রহ করা হয়েছিল, যার মধ্যে 16 প্রাপ্তবয়স্ক <30 বছর বয়সী, 7 প্রাপ্তবয়স্ক > 40 বছর বয়সী এবং 19 জন পুরুষ, 17 জন মহিলা।36টি অনুনাসিক সোয়াব নমুনা সংগ্রহ করা হয়েছিল, যার মধ্যে 16 প্রাপ্তবয়স্ক <30 বছর বয়সী, 7 প্রাপ্তবয়স্ক > 40 বছর বয়সী এবং 19 জন পুরুষ, 17 জন মহিলা।Было собрано 36 образцов мазков из носа, в которых приняли участие 16 взрослых < 30 лет, 7 взрослых старще , 40 ж19ж19.30 বছরের কম বয়সী 16 জন প্রাপ্তবয়স্ক, 40 বছরের বেশি বয়সী 7 জন প্রাপ্তবয়স্ক, 19 জন পুরুষ এবং 17 জন মহিলার কাছ থেকে 36টি অনুনাসিক সোয়াব নমুনা সংগ্রহ করা হয়েছিল.জনসংখ্যা সংক্রান্ত তথ্য পরিপূরক সারণী 3 এ উপস্থাপিত হয়। সমস্ত অংশগ্রহণকারীদের কাছ থেকে অবহিত সম্মতি প্রাপ্ত হয়েছিল।সমস্ত অংশগ্রহণকারীদের ইনফ্লুয়েঞ্জা থাকার সন্দেহ ছিল এবং ক্ষতিপূরণ ছাড়াই স্বেচ্ছায় পরীক্ষা করা হয়েছিল।
ফাস্ট বেস এবং ঢাকনা পলিল্যাকটিক অ্যাসিড (PLA) দিয়ে তৈরি এবং এন্ডার 3 প্রো 3D প্রিন্টার (Shenzhen Transcend 3D Technology Co., Ltd.) দ্বারা মুদ্রিত।ডবল সাইডেড টেপটি অ্যাডেসিভ রিসার্চ, ইনকর্পোরেটেড মডেল 90880 থেকে কেনা হয়েছিল। PET ফিল্ম 100 µm পুরু ম্যাকমাস্টার-কার থেকে কেনা হয়েছিল।আঠালো এবং পিইটি ফিল্ম উভয়ই সিলুয়েট আমেরিকা, ইনকর্পোরেটেডের সিলুয়েট ক্যামিও 2 কাটার ব্যবহার করে কাটা হয়েছিল। ইলাস্টিক ফিল্মটি ইনজেকশন ছাঁচনির্মাণ দ্বারা PDMS উপাদান দিয়ে তৈরি।প্রথমে, একটি 200 µm পুরু PET ফ্রেম একটি লেজার সিস্টেম ব্যবহার করে কাটা হয়েছিল এবং 100 µm ডবল-পার্শ্বযুক্ত আঠালো টেপ ব্যবহার করে একটি 3 মিমি পুরু PMMA শীটে আঠালো।PDMS পূর্ববর্তী (Sylgard 184; Part A: Part B = 10:1, Dow Corning) তারপর ছাঁচে ঢেলে দেওয়া হয়েছিল এবং অতিরিক্ত PDMS অপসারণের জন্য একটি কাচের রড ব্যবহার করা হয়েছিল।70° C. তাপমাত্রায় 3 ঘন্টার জন্য নিরাময় করার পরে, 300 μm পুরু PDMS ফিল্মটি ছাঁচ থেকে খোসা ছাড়ানো যেতে পারে।
বহুমুখী বিতরণ, চাহিদা অনুযায়ী প্রকাশনা এবং নির্ভরযোগ্য পারফরম্যান্সের জন্য ফটোগুলি একটি উচ্চ-গতির ক্যামেরা (Sony AX700 1000 fps) দিয়ে তোলা হয়।নির্ভরযোগ্যতা পরীক্ষায় ব্যবহৃত অরবিটাল শেকারটি SCILOGEX (SCI-O180) থেকে কেনা হয়েছিল।বায়ুর চাপ একটি বায়ু সংকোচকারী দ্বারা উত্পন্ন হয় এবং চাপের মান সামঞ্জস্য করতে বেশ কয়েকটি ডিজিটাল নির্ভুল চাপ নিয়ন্ত্রক ব্যবহার করা হয়।প্রবাহ আচরণ পরীক্ষার প্রক্রিয়াটি নিম্নরূপ।একটি পূর্বনির্ধারিত পরিমাণ তরল পরীক্ষা ডিভাইসে ইনজেকশন করা হয়েছিল এবং প্রবাহ আচরণ রেকর্ড করতে একটি উচ্চ গতির ক্যামেরা ব্যবহার করা হয়েছিল।তারপরে স্থির চিত্রগুলি নির্দিষ্ট সময়ে প্রবাহ আচরণের ভিডিওগুলি থেকে নেওয়া হয়েছিল, এবং অবশিষ্ট এলাকাটি ইমেজ-প্রো প্লাস সফ্টওয়্যার ব্যবহার করে গণনা করা হয়েছিল, যা তখন ভলিউম গণনা করতে ক্যামেরার গভীরতা দ্বারা গুণিত হয়েছিল।প্রবাহ আচরণ পরীক্ষা পদ্ধতির বিশদ পরিপূরক চিত্র S4 এ পাওয়া যাবে।
50 μl মাইক্রোবিডস এবং 100 μl ডিওনাইজড জল শিশি মিক্সিং ডিভাইসে প্রবেশ করান।0.1 বার, 0.15 বার এবং 0.2 বার চাপে প্রতি 0.1 সেকেন্ডে একটি উচ্চ গতির ক্যামেরা দিয়ে মিশ্র পারফরম্যান্সের ছবি তোলা হয়েছিল।মিশ্রণ প্রক্রিয়া চলাকালীন পিক্সেল তথ্য ফটো প্রসেসিং সফ্টওয়্যার (ফটোশপ CS6) ব্যবহার করে এই ছবিগুলি থেকে প্রাপ্ত করা যেতে পারে।এবং নিম্নলিখিত সমীকরণ 53 দিয়ে মিশ্রণ দক্ষতা অর্জন করা যেতে পারে।
যেখানে M হল মিশ্রণের দক্ষতা, N হল নমুনা পিক্সেলের মোট সংখ্যা, এবং ci এবং \(\bar{c}\) হল স্বাভাবিক এবং প্রত্যাশিত স্বাভাবিক ঘনত্ব।মিশ্রণের দক্ষতা 0 (0%, অমিশ্রিত) থেকে 1 (100%, সম্পূর্ণ মিশ্র) পর্যন্ত।ফলাফল পরিপূরক চিত্র S6 এ দেখানো হয়েছে।
IAV এবং IBV এর জন্য রিয়েল-টাইম RT-PCR কিট, যার মধ্যে IAV এবং IBV RNA নমুনা (বিড়াল নং RR-0051-02/RR-0052-02, Liferiver, China), Tris-EDTA বাফার (TE বাফার নং B541019) , Sangon Biotech, China), পজিটিভ কন্ট্রোল RNA পিউরিফিকেশন কিট (Part No. Z-ME-0010, Liferiver, China) এবং GAPDH Solution (Part No. M591101, Sangon Biotech, China) বাণিজ্যিকভাবে উপলব্ধ৷আরএনএ বিশুদ্ধকরণ কিটে একটি বাঁধাই বাফার, ওয়াশ এ, ওয়াশ ডব্লিউ, ইলুয়েন্ট, ম্যাগনেটিক মাইক্রোবিডস এবং একটি এক্রাইলিক ক্যারিয়ার অন্তর্ভুক্ত রয়েছে।IAV এবং IBV রিয়েল-টাইম RT-PCR কিটগুলির মধ্যে রয়েছে IFVA নিউক্লিক অ্যাসিড পিসিআর সনাক্তকরণ মিশ্রণ এবং RT-PCR এনজাইম।500 μl বাঁধাই বাফার দ্রবণে 6 µl AcrylCarrier এবং 20 µl চৌম্বক পুঁতি যোগ করুন, ভালভাবে ঝাঁকান এবং তারপর পুঁতির সমাধান প্রস্তুত করুন।A এবং W ধোয়াতে 21 মিলি ইথানল যোগ করুন, যথাক্রমে A এবং W এর সমাধান পেতে ভালভাবে ঝাঁকান।তারপর, IFVA নিউক্লিক অ্যাসিডের সাথে 18 μl ফ্লুরোসেন্ট পিসিআর মিশ্রণ এবং 1 μl RT-PCR এনজাইম 1 μl TE দ্রবণে যোগ করা হয়েছিল, 20 μl IAV এবং IBV প্রাইমার প্রাপ্ত করে কয়েক সেকেন্ডের জন্য ঝাঁকান এবং সেন্ট্রিফিউজ করা হয়েছিল।
নিম্নলিখিত RNA পরিশোধন পদ্ধতি অনুসরণ করুন: (1) RNA শোষণ।একটি 1.5 মিলি সেন্ট্রিফিউজ টিউবের মধ্যে 526 μl পেলেট দ্রবণটি পিপেট করুন এবং 150 μl নমুনা যোগ করুন, তারপর ম্যানুয়ালি টিউবটিকে 10 বার উপরে এবং নীচে ঝাঁকান।মিশ্রণের 676 μl অ্যাফিনিটি কলামে স্থানান্তর করুন এবং 60 সেকেন্ডের জন্য 1.88 x 104 গ্রাম সেন্ট্রিফিউজ করুন।পরবর্তী ড্রেন তারপর বাতিল করা হয়.(2) ধোয়ার প্রথম পর্যায়।অ্যাফিনিটি কলামে 500 μl ওয়াশ দ্রবণ A যোগ করুন, 40 সেকেন্ডের জন্য 1.88 x 104 গ্রাম সেন্ট্রিফিউজ করুন এবং ব্যয়িত দ্রবণটি ফেলে দিন।এই ধোয়ার প্রক্রিয়াটি দুবার পুনরাবৃত্তি হয়েছিল।(3) ধোয়ার দ্বিতীয় পর্যায়।অ্যাফিনিটি কলামে 500 μl ওয়াশ সলিউশন W যোগ করুন, 15 সেকেন্ডের জন্য 1.88×104 গ্রাম সেন্ট্রিফিউজ করুন এবং খরচ করা দ্রবণটি বাতিল করুন।এই ধোয়ার প্রক্রিয়াটি দুবার পুনরাবৃত্তি হয়েছিল।(4) ইলিউশন।অ্যাফিনিটি কলামে 200 μl ইলুয়েট যোগ করুন এবং 2 মিনিটের জন্য 1.88 x 104 গ্রাম সেন্ট্রিফিউজ করুন।(5) RT-PCR: একটি পিসিআর টিউবে প্রাইমার দ্রবণের 20 μl এর মধ্যে ইলুয়েট ইনজেকশন করা হয়েছিল, তারপর টিউবটি RT-PCR প্রক্রিয়াটি চালানোর জন্য একটি রিয়েল-টাইম পিসিআর পরীক্ষা যন্ত্রপাতি (SLAN-96P) এ স্থাপন করা হয়েছিল।সম্পূর্ণ শনাক্তকরণ প্রক্রিয়াটি প্রায় 140 মিনিট সময় নেয় (আরএনএ পরিশোধনের জন্য 20 মিনিট এবং পিসিআর সনাক্তকরণের জন্য 120 মিনিট)।
526 µl পুঁতি দ্রবণ, 1000 µl ওয়াশ সলিউশন A, 1000 µl ওয়াশ সলিউশন, 200 µl এলুয়েট এবং 20 µl প্রাইমার দ্রবণ প্রাথমিকভাবে M, W1, W2, E এবং PCR সনাক্তকরণ চেম্বারে যুক্ত এবং সংরক্ষণ করা হয়েছিল।প্ল্যাটফর্ম সমাবেশ।তারপরে, নমুনার 150 μl চেম্বার এম-এ পাইপেটেড করা হয়েছিল এবং FAST-POCT প্ল্যাটফর্মটি পরিপূরক চিত্র S9-এ দেখানো পরীক্ষার উপকরণে ঢোকানো হয়েছিল।প্রায় 82 মিনিট পরে, পরীক্ষার ফলাফল পাওয়া যায়।
অন্যথায় উল্লেখ করা না থাকলে, শুধুমাত্র FAST-POCT প্ল্যাটফর্ম এবং জৈবিকভাবে স্বাধীন নমুনা ব্যবহার করে ন্যূনতম ছয়টি প্রতিলিপি করার পরে সমস্ত পরীক্ষার ফলাফল গড় ± SD হিসাবে উপস্থাপন করা হয়।বিশ্লেষণ থেকে কোন তথ্য বাদ দেওয়া হয়নি.পরীক্ষাগুলি এলোমেলো নয়।গবেষকরা পরীক্ষার সময় গ্রুপের কাজগুলিতে অন্ধ ছিলেন না।
অধ্যয়নের নকশা সম্পর্কে আরও তথ্যের জন্য, এই নিবন্ধের সাথে লিঙ্ক করা প্রকৃতি গবেষণা প্রতিবেদন বিমূর্ত দেখুন।
এই গবেষণার ফলাফল সমর্থনকারী ডেটা পরিপূরক তথ্যে পাওয়া যায়।এই নিবন্ধটি মূল তথ্য প্রদান করে।
ছাগলা, জেড এবং মধুকর, পি. ধনী দেশগুলিতে কোভিড-১৯ বুস্টার সকলের জন্য ভ্যাকসিন বিলম্বিত করবে।ছাগলা, জেড এবং মধুকর, পি. ধনী দেশগুলিতে কোভিড-১৯ বুস্টার সকলের জন্য ভ্যাকসিন বিলম্বিত করবে।ছাগলা, জেড এবং মধুকর, পি. ধনী দেশগুলিতে কোভিড-১৯ বুস্টার সকলের জন্য ভ্যাকসিন বিলম্বিত করবে।ছাগলা, জেড. এবং মধুকর, পি. ধনী দেশগুলিতে কোভিড-১৯ টিকাকরণ সবার জন্য টিকা দিতে বিলম্ব করবে৷জাতীয় ঔষধ।27, 1659-1665 (2021)।
ফাউস্ট, এল. এট আল।নিম্ন এবং মধ্যম আয়ের দেশগুলিতে SARS-CoV-2 পরীক্ষা: বেসরকারি স্বাস্থ্যসেবা খাতে প্রাপ্যতা এবং সামর্থ্য।জীবাণু সংক্রমণ।22, 511–514 (2020)।
বিশ্ব স্বাস্থ্য সংস্থা.নির্বাচিত নিরাময়যোগ্য যৌন সংক্রামিত সংক্রমণের বিশ্বব্যাপী ব্যাপকতা এবং ঘটনা: একটি পর্যালোচনা এবং অনুমান।জেনেভা: WHO, WHO/HIV_AIDS/2 https://apps.who.int/iris/bitstream/handle/10665/66818/WHO_HIV_AIDS_2001.02.pdf (2001)।
ফেন্টন, ইএম এট আল।একাধিক 2D ঢালাই পার্শ্ব প্রবাহ পরীক্ষা স্ট্রিপ.ASS আবেদন।মাতৃশিক্ষায়তন.ইন্টার মিলান.1, 124-129 (2009)।
শিলিং, কেএম এট আল।সম্পূর্ণরূপে আবদ্ধ microfluidic কাগজ-ভিত্তিক বিশ্লেষণ ডিভাইস.মলদ্বাররাসায়নিক।84, 1579-1585 (2012)।
ল্যাপেন্টার, এন. এট আল।প্রতিযোগিতামূলক কাগজ-ভিত্তিক ইমিউনোক্রোমাটোগ্রাফি এনজাইম-পরিবর্তিত ইলেক্ট্রোডের সাথে মিলিত মূত্রনালীর কোটিনিনের বেতার পর্যবেক্ষণ এবং ইলেক্ট্রোকেমিক্যাল নির্ধারণের অনুমতি দেয়।সেন্সর 21, 1659 (2021)।
ঝু, এক্স এবং অন্যান্য।একটি গ্লুকোমিটার ব্যবহার করে বহুমুখী ন্যানোজাইম-ইন্টিগ্রেটেড পাশ্বর্ীয় তরল প্ল্যাটফর্মের সাথে রোগের বায়োমার্কারগুলি পরিমাপ করা।জৈবিক সেন্সর।বায়োইলেক্ট্রনিক্স।126, 690–696 (2019)।
বু, এস. এট আল।কনকানাভালিন A-হিউম্যান কোরিওনিক গোনাডোট্রপিন-Cu3(PO4)2 হাইব্রিড ন্যানোফ্লাওয়ার, ম্যাগনেটিক সেপারেশন এবং স্মার্ট ফোন রিডিং ব্যবহার করে প্যাথোজেনিক ব্যাকটেরিয়া সনাক্তকরণের জন্য গর্ভাবস্থা পরীক্ষার স্ট্রিপ।মাইক্রোকম্পিউটার।ম্যাগাজিন।185, 464 (2018)।